前言 化疗耐药是肺癌化疗疗效较低的主要原因之一。许多抗癌药是通过损伤生物大分子(如形成DNA交联)而达到杀伤肿瘤细胞的。所以，肿瘤细胞如能阻止DNA损伤和/或能对损伤的DNA予以修复，则出现耐药。06-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(06-methylguanine-DNA methyltransferase，MGMT)是一种重要的DNA修复蛋白酶，可修复烷基化的DNA，在抵制烷基化药物对肿瘤的杀伤过程中起重要作用。根据MGMT含量高低，可将肿瘤细胞分为两组：Mer+组，含MGMT较高，对烷化剂有一定抗药性；Mer-组，不含或少含MGMT，易受烷化剂损伤。关于MGMT表达与非小细胞肺癌化疗耐药及预后关系的研究较少，国内尚未见报道。本实验应用免疫组化方法检测MGMT在肺癌组织中表达情况，目的是研究MGMT表达与肺癌化疗耐药及预后生存期的关系，为肺癌的化疗方案选择提供新的参考依据。 材料与方法 128例肺癌组织蜡块取自1977年～2000年肺叶切除标本，术前未经治疗，术后单纯化疗79例，放疗及放疗加化疗41例，未治疗8例。在术后单纯化疗的79例中，45例肺叶切除后出现复发转移，有客观可测病灶，其中鳞癌22例，腺癌23例，我们仅对此45例进行化疗疗效分析，以除外放疗对结果的影响。采用免疫组化S-P法检测MGMT表达，结果判定标准：光镜下每张切片选择5个高倍视野计数500个癌细胞。(1)按阳性细胞百分率计分：o二＜5％的细胞核阳性，1＝6－50％的细胞核阳性，二一＞50％的细胞核阳性。K）按染色强度计分对一无着色J二弱，二二强。将两项相加，得分 0一互为阴性，即 Mer－；2－4为阳性，即 Mer＋。化疗客观疗效评定标准（WHO八门）完全缓解（CR人所见肿瘤病变完全消失并至少维持4周以上。p）部分缓解（PR人肿瘤病灶的最大径及其最大垂直径的乘积减少50％以上，并至少维持4周以上，无新病灶出现。p）无变化（NC卜肿瘤病灶的两径乘积缩／J’50％以下或增大25％以下，无新病灶出现。门）恶化（PD人肿瘤病灶的两径乘积增大 25％以上或新病灶出现。有效率二 CR率十PR率。统计学分析：采用 X‘检验和方差分析对数据进行统计学处理，对生存数据采用KaPlan－Meter分析，并绘制生存曲线，应用k－rnk检验差异性，P＜0．05时判断有意义。 结 果 10例正常肺组织中的上皮及间质细胞未见MGMT阳性表达。128例NSCLC组织中阳性表达率为47．66％N八。M GMGMT表达分布在细胞核及细胞浆中，计数以细胞核为准。MGMT表达与肺癌患者的性别，年龄，肿瘤分期，术中淋巴结转移，组织类型等临床病理特征间的差异无统计学意义，P＞o．05。但与术后平均生存期及5年生存率明显相关。Mer一组及 Mer十组的平均生存期分别为36．88月及18．加月，P＜o．05；5年生存率分别为29．85％及8．20阮，P＜o．01。Me。一组预后明显好于Mer十组。45例因术后复发转移而行单纯化疗病例中，Mer一组总的化疗有效率为42．86％u 人其中鳞癌为 41．67％，腺癌为 33．33％；Mer十组总的化疗有效率为4．17助O人贝卢P＜o．001，其中，鳞癌为0，P＜O．01，腺癌为7．1＊阮，P＜o．仍，有显著性差异。 应用 KaPan－Meter绘制生存曲线，128例 NSCLC中，Mer－ ·2·组生存率明显高于 Mer十组，应用 log－ralll’检验 MGMT表达与生存率的关系，差异显著，P＜o．01；45例术后复发转移后行单纯化疗的病例中，Mer一组的生存率明显高于Mer十组，P＜0·05。128例 NSCLC中，Mer一组平均生存期为 36．88月，是 Mer十组（18．00月）的 2倍，P＜o．05；5年生存率为 29．85呢，为 Mer十组K．20％）的3．6倍，P＜o．0＼说明＊＊＊T高表达不利于地＊u预后。45例单纯化疗患者中，Mer一组平均生存期为32．12月，Mer十组为 12．79月，P＜0．01；鳞癌 Mer一组与 Mer十组平均生存期拥u为3个36月及13．67月，P＜o．肪；腺癌Mer一组与Mer十组平均生存期分别为3O．27月及12．go月八＜o．05。表明＊＊＊T高表达也是影响NSCLC化疗远期疗效一生存期、生存率的重要因素。 讨 论 对MGMT的研究揭示了肿瘤化疗耐药的分子机理，MGMT是人类细胞自我保护，防御烷化剂所致DNA损伤的关键因素，是一种重要的DNA修复蛋白酶。MGMT存在于人类正常细胞及肿瘤组织中，其表达水平与MGMTmRNA转录水平有关，部分处于被封闭状态而不能表达MGMT。本实验结果显示，10例正常肺组织的上皮及同质无MGMT阳性表达，可能是由于mRNA处于被封闭状态的结果。当有损伤因素刺激时可能使MGMTmRNA翻译表达，从而起到抗损伤作用。对肿瘤组织中MGMT表达的研究表明，多数肿瘤组织内部存在着MGMT，抵御抗肿瘤药物的细胞杀伤作用。在肺癌，乳腺癌中MGMT含量常较高，表明肿瘤组织内部存在着先天耐药机制。本组实验结果也显示出肺癌组织中有较高表达，其表达率为47．66％u八28＊说明MGMT表达与肺癌先天耐药机制密切相关。 ·3· MGMT