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前言 化疗耐药是肺癌化疗疗效较低的主要原因之一。许多抗癌药是通过损伤生物大分子(如形成DNA交联)而达到杀伤肿瘤细胞的。所以,肿瘤细胞如能阻止DNA损伤和/或能对损伤的DNA予以修复,则出现耐药。06-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(06-methylguanine-DNA methyltransferase,MGMT)是一种重要的DNA修复蛋白酶,可修复烷基化的DNA,在抵制烷基化药物对肿瘤的杀伤过程中起重要作用。根据MGMT含量高低,可将肿瘤细胞分为两组:Mer+组,含MGMT较高,对烷化剂有一定抗药性;Mer-组,不含或少含MGMT,易受烷化剂损伤。关于MGMT表达与非小细胞肺癌化疗耐药及预后关系的研究较少,国内尚未见报道。本实验应用免疫组化方法检测MGMT在肺癌组织中表达情况,目的是研究MGMT表达与肺癌化疗耐药及预后生存期的关系,为肺癌的化疗方案选择提供新的参考依据。 材料与方法 128例肺癌组织蜡块取自1977年~2000年肺叶切除标本,术前未经治疗,术后单纯化疗79例,放疗及放疗加化疗41例,未治疗8例。在术后单纯化疗的79例中,45例肺叶切除后出现复发转移,有客观可测病灶,其中鳞癌22例,腺癌23例,我们仅对此45例进行化疗疗效分析,以除外放疗对结果的影响。采用免疫组化S-P法检测MGMT表达,结果判定标准:光镜下每张切片选择5个高倍视野计数500个癌细胞。(1)按阳性细胞百分率计分:o二<5%的细胞核阳性,1=6-50%的细胞核阳性,二一>50%的细胞核阳性。K)按染色强度计分对一无着色J二弱,二二强。将两项相加,得分 0一互为阴性,即 Mer-;2-4为阳性,即 Mer+。化疗客观疗效评定标准(WHO八门)完全缓解(CR人所见肿瘤病变完全消失并至少维持4周以上。p)部分缓解(PR人肿瘤病灶的最大径及其最大垂直径的乘积减少50%以上,并至少维持4周以上,无新病灶出现。p)无变化(NC卜肿瘤病灶的两径乘积缩/J’50%以下或增大25%以下,无新病灶出现。门)恶化(PD人肿瘤病灶的两径乘积增大 25%以上或新病灶出现。有效率二 CR率十PR率。统计学分析:采用 X‘检验和方差分析对数据进行统计学处理,对生存数据采用KaPlan-Meter分析,并绘制生存曲线,应用k-rnk检验差异性,P<0.05时判断有意义。 结 果 10例正常肺组织中的上皮及间质细胞未见MGMT阳性表达。128例NSCLC组织中阳性表达率为47.66%N八。M GMGMT表达分布在细胞核及细胞浆中,计数以细胞核为准。MGMT表达与肺癌患者的性别,年龄,肿瘤分期,术中淋巴结转移,组织类型等临床病理特征间的差异无统计学意义,P>o.05。但与术后平均生存期及5年生存率明显相关。Mer一组及 Mer十组的平均生存期分别为36.88月及18.加月,P<o.05;5年生存率分别为29.85%及8.20阮,P<o.01。Me。一组预后明显好于Mer十组。45例因术后复发转移而行单纯化疗病例中,Mer一组总的化疗有效率为42.86%u 人其中鳞癌为 41.67%,腺癌为 33.33%;Mer十组总的化疗有效率为4.17助O人贝卢P<o.001,其中,鳞癌为0,P<O.01,腺癌为7.1*阮,P<o.仍,有显著性差异。 应用 KaPan-Meter绘制生存曲线,128例 NSCLC中,Mer- ·2·组生存率明显高于 Mer十组,应用 log-ralll’检验 MGMT表达与生存率的关系,差异显著,P<o.01;45例术后复发转移后行单纯化疗的病例中,Mer一组的生存率明显高于Mer十组,P<0·05。128例 NSCLC中,Mer一组平均生存期为 36.88月,是 Mer十组(18.00月)的 2倍,P<o.05;5年生存率为 29.85呢,为 Mer十组K.20%)的3.6倍,P<o.0\说明***T高表达不利于地*u预后。45例单纯化疗患者中,Mer一组平均生存期为32.12月,Mer十组为 12.79月,P<0.01;鳞癌 Mer一组与 Mer十组平均生存期拥u为3个36月及13.67月,P<o.肪;腺癌Mer一组与Mer十组平均生存期分别为3O.27月及12.go月八<o.05。表明***T高表达也是影响NSCLC化疗远期疗效一生存期、生存率的重要因素。 讨 论 对MGMT的研究揭示了肿瘤化疗耐药的分子机理,MGMT是人类细胞自我保护,防御烷化剂所致DNA损伤的关键因素,是一种重要的DNA修复蛋白酶。MGMT存在于人类正常细胞及肿瘤组织中,其表达水平与MGMTmRNA转录水平有关,部分处于被封闭状态而不能表达MGMT。本实验结果显示,10例正常肺组织的上皮及同质无MGMT阳性表达,可能是由于mRNA处于被封闭状态的结果。当有损伤因素刺激时可能使MGMTmRNA翻译表达,从而起到抗损伤作用。对肿瘤组织中MGMT表达的研究表明,多数肿瘤组织内部存在着MGMT,抵御抗肿瘤药物的细胞杀伤作用。在肺癌,乳腺癌中MGMT含量常较高,表明肿瘤组织内部存在着先天耐药机制。本组实验结果也显示出肺癌组织中有较高表达,其表达率为47.66%u八28*说明MGMT表达与肺癌先天耐药机制密切相关。 ·3· MGMT