油菜花粉提取物对前列腺癌细胞生长抑制效应及机理的实验研究

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前列腺癌是中老年男性最为普遍的癌症,是导致男性癌症患者死亡的第二位因素,仅次于肺癌。特别是在男性70岁后,其发病率更是显著上升。药理学实验研究表明,花粉及其组分具有抗肿瘤、抗氧化性、治疗前列腺疾病、降血脂及增强机体免疫能力等多种生理功能。近年来,国内外关于花粉及其提取物抑制肿瘤细胞生长的研究已有报道,但有关油菜花粉提取物对前列腺癌细胞生长抑制效应及其机理的研究却很少。本研究为探明纯度较高的油菜花粉提取物(脂溶性成分)对前列腺癌细胞生长抑制效应及机理,采用CCK-8法检测油菜花粉提取物对体外培养的人前列腺癌PC-3、DU-145细胞及肺腺癌A549细胞的细胞毒作用;通过流式细胞仪检测细胞周期及凋亡率变化;并通过形态学实验(电镜)观察细胞凋亡情况。细胞毒性效应实验的结果表明:油菜花粉提取物可以抑制三种肿瘤细胞的生长,并未出现选择性抑制效应,在一定剂量范围(0~1000μg/mL)呈浓度和时间依赖性,浓度越高,抑制率越大,并且上述三种肿瘤细胞对油菜花粉提取物的敏感性不同:油菜花粉提取物对PC-3、DU-145及A549细胞的半数抑制浓度(IC50)分别为386μg/mL、545μg/mL、346μg/mL对于三种细胞系来说,低、中浓度油菜花粉提取物在作用时间为24h时并未出现对细胞产生抑制效应,在48h、72h时才具有抑制效应;而高浓度则在三个时间点均对细胞有抑制效应,并呈浓度依赖性。形态学(电镜)实验结果表明,经药物处理后,诱导细胞发生不同程度的凋亡,主要表现在:细胞核固缩,染色质凝集或边聚,胞浆内出现空泡,并且出现凋亡小体样结构。预示油菜花粉提取物可能通过诱导肿瘤细胞凋亡来抑制细胞增殖。流式细胞仪检厕结果显示:不同浓度的药物作用PC-3、 DU145及A549细胞48h后,各细胞周期及凋亡率发生了改变。PC-3及DU-145细胞在用油菜花粉提取物(浓度为1000μg/mL)处理48h后,G0/G1期比例上升,分别为67.33%和68.15%,S期和G2-M期比例下降,PC-3下降为16.66%和16.01%,DU-145为21.22%和10.63%;而A549细胞在用油菜花粉提取物(浓度为1000μg/mL)处理48h后,G0/G1期细胞比例下降为55.15%,S期和G2-M期比例则分别上升为28.22%和16.63%。预示油菜花粉提取物可能通过调控各肿瘤细胞周期来发挥其对各肿瘤细胞的生长抑制作用,其可能通过阻抑前列腺癌PC-3和DU-145细胞在G0/G1期来抑制细胞增殖。此外,不同浓度药物作用肺腺癌细胞A549、前列腺癌细胞PC-3后,两细胞凋亡率与药物作用时间及作用浓度有关。
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