大豆β-伴球蛋白α-亚基基因启动子的功能研究

来源 :南开大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:gm_686
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
自1983年首次获得转基因烟草和马铃薯以来,经过二十余年的发展,植物基因工程的研究和发展非常迅速。植物转基因技术作为一种新型农业技术,带动全球性生物农业的大发展是大势所趋。但是,目前植物基因工程技术也有不少不足之处,如表达量低、表达不稳定、改变农作物的优良农艺性状等。其中种子特异性启动子的使用是解决此类问题的一个重要手段。 大豆β-伴球蛋白是大豆种子贮藏蛋白的重要组成部分。大豆β-伴球蛋白由α-、α-和β-亚基等三个亚基组成。本实验室在前期工作中通过PCR方法从大豆品种吉林43基因组DNA中分离到大豆β-伴球蛋白α-亚基基因启动子片段(BCSP501),两次TAILPCR之后获得了启动子片段BCSP952。序列分析表明,启动子片段BCSP952中含有种子特异性启动子所需的启动子序列元件:TATA盒、CAAT盒、A/T富含序列元件、RY重复序列元件、AGCCCA序列元件、TACACAT序列元件、ACGT序列元件、E盒等多种多拷贝的序列元件。为了进一步确定该启动子的核心序列元件,在序列分析的基础上我们设计了多个5缺失片段(BCSP156,BCSP285,BCSP471,BCSP666,BCSP952),以GUS基因为报告基因构建表达载体(PBB156-PBB952),以叶盘法转化烟草,转基因烟草的GUS酶荧光光度分析和组织化学检测均表明所有片段均只在种子中特异性表达GUS酶活性,并且在种子发育的中后期才开始大量表达。其中BCSP285的活性为BCSP156的3倍左右,而BCSP471的表达量为BCSP285的35倍以上,其它更长的片段与BCSP471的表达量没有明显差异。 为了进一步验证该种子启动子在植物基因工程中的应用前景。我们分别用这一启动子的BCSP666片段/35S启动子和高山被孢霉△6-脂肪酸脱氢酶基因(MAD6D)构建了表达γ-亚麻酸(GLA)的植物表达载体pCPNMA666和pCPNMA,转化烟草植株。在pCPNMA666的转基因烟草的种子当中检测到了4.36%的GLA,而在根和叶片当中没有检测到该产物。对照pCPNMA相反,在根和叶片当中检测到了GLA,而种子当中未检测到。
其他文献
目的 探究将胺碘酮联合阿替洛尔应用于治疗冠心病合并心律失常患者中的效果,评价其临床应用意义.方法 在我院数据库中选择时间段2017年4月至2018年5月间收入的所有冠心病合并
目的 为眼科短小手术患儿提供七氟烷麻醉的临床效果进行研究.方法 将来我院治疗的眼科短小手术患儿作为研究对象,患儿就诊时间为2018年4月至2019年5月,此期间入选的患儿共有8
  本文以旋花科的牵牛为材料,通过研究其花色素代谢途径中的三个关键酶(的基因在牵牛中的作用模式,探讨了花色的表型选择对分子进化有无影响,以确定基因组变异和表型变异的相
目的 探讨糖尿病合并蛛网膜下腔出血术后入住ICU的患者,应用右美托米啶(DEX)的镇静效果、血糖指标的影响.方法 将本院收治的52例糖尿病合并蛛网膜下腔出血术后患者随机分为对
目的:通过比较正常Sprague-Dawley(SD)大鼠和围绝经期模型的SD大鼠,正常育龄期女性和围绝经期女性外周血T淋巴细胞亚群、CD4+和CD8+T淋巴细胞上连接蛋白(Connexin,Cx)40和43表达
随着智能建筑与自动控制技术的飞速发展,中央空调系统作为大型建筑不可或缺的一部分。因其结构复杂、系统庞大、非线性与大滞后性等特性导致其成为建筑物耗电量大户,如何实现
目的 探讨眼底激光联合羟苯磺酸钙在糖尿病视网膜病变治疗中的应用.方法 对我院160例糖尿病视网膜病变患者进行随机分组治疗,实验组80例采用眼底激光联合羟苯磺酸钙治疗,对照
目的 探讨氯吡格雷与阿司匹林治疗老年冠心病的临床疗效.方法 择本院2018年3月-2019年3月期间收治的66例冠心病患者作为本次研究对像,氯吡格雷与阿司匹林治疗老年冠心病的临
目的 探究不同剂量他汀类药物应用于急性心肌梗死患者治疗中的效果,分析其临床应用价值.方法 本次研究实验时段设置为2016年9月至2017年3月,在该时段内对我院中所有急性心肌
时间:2013年9月30日地点:张耀来画室2013年9月13日,“中华文明历史题材美术创作工程”在国家博物馆举行了创作草图观摩展开幕与签约仪式,天津美术学院共有6位教授的5件作品入