论文部分内容阅读
乳腺癌是严重危害女性健康的恶性肿瘤之一,其发病率占人体各种恶性肿瘤的7%～～10%左右。我国每年大约有4万多人死于乳腺癌。乳腺癌是机体内外多种因素共同作用的结果,但其发病的机制还并不完全清楚。乳腺癌的主要治疗方法有手术治疗、化学治疗、放射治疗和生物治疗等,但各种治疗手段均存在副作用,受到一定程度的限制。因此,进一步深入研究乳腺癌的发病机理,有助于乳腺癌的早期诊断,从而达到早期预防和治疗。曲妥珠是人表皮生长因子受体-2(human epidermal growth factor receptor-2, HER2)的单克隆抗体,临床上用于治疗HER2阳性乳腺癌患者。硫氧还蛋白是机体内重要的氧化还原调节蛋白,普遍存在于原核生物和真核生物中,具有调节转录因子活性、抗氧化、抗凋亡、促进细胞生长和调节炎症反应等多种生理功能。硫氧还蛋白结合蛋白-2是硫氧还蛋白的负调控蛋白,能与硫氧还蛋白的活性位点结合,抑制硫氧还蛋白的氧化还原活性。在多种癌症组织中,硫氧还蛋白表达增高,而硫氧还蛋白结合蛋白-2表达减少或者缺失。细胞周期蛋白D1是细胞周期进程调节蛋白,其在癌症组织中表达明显的增加。环氧合酶-2是花生四烯酸代谢中的一种限速酶,环氧合酶-2具有抑制细胞凋亡和上调血管内皮生成因子的作用,在癌症组织中表达明显增高。本研究主要利用不同浓度的曲妥珠刺激HER2阳性乳腺癌细胞株(MCF-7),通过蛋白免疫印迹杂交和实时定量PCR的方法检测乳腺癌细胞中硫氧还蛋白、硫氧还蛋白结合蛋白-2、细胞周期蛋白D1、细胞周期依赖蛋白5、pro-caspase-9及环氧合酶-2的表达变化情况。本研究发现：曲妥珠能下调硫氧还蛋白的蛋白水平和mRNA水平,但是硫氧还蛋白结合蛋白-2的mRNA水平并没有发生明显的变化；此外,曲妥珠抑制了细胞周期蛋白D1、pro-caspase-9的表达,而细胞周细胞周期依赖蛋白激酶5(Cyclin-dependent kinase 5, CDK5)和环氧合酶-2则无明显变化。以上实验结果表明：硫氧还蛋白、细胞周期蛋白D1、Caspase-9和参与曲妥珠的抗肿瘤作用。本研究进一步明确曲妥珠的抗肿瘤作用的分子机制,可为开发治疗乳腺癌新药物提供新的靶点。