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目的:肺癌是我国最常见的恶性肿瘤之一。2015年,国家癌症中心发布的数据显示,2006-2011年我国肺癌5年发病率为130.2(1/10万)。在我国肺癌发病率仍呈逐年上升趋势,其中约85%的肺癌为非小细胞肺癌(Non-small cell lung cancer，NSCLC)。尽管肺癌的治疗不断进展,但其5年生存率仍低于20%。研究显示在初诊时,57%的肺癌患者已经发生了远处转移，TNM分期为晚期。顺铂(Cisplatin,DDP)是晚期非小细胞肺癌一线化疗方案的重要组成部分。然而,毒副作用以及获得性耐药的产生是临床DDP治疗失败的主要原因。白藜芦醇(Resveratrol，RSV)是一种天然多酚类化合物,研究表明RSV具有多种生物活性,比如抗炎、抗氧化、保护心血管系统等。近年来,白藜芦醇抗肿瘤作用逐渐引起人们关注。与其他抗肿瘤药物联合使用时,RSV能增强其他抗肿瘤药物的活性,具有良好的应用前景。本研究旨在以人非小细胞肺癌细胞株A549为研究对象,探讨白藜芦醇能否增强顺铂对A549细胞的抗肿瘤效应以及可能的分子学机制,为肺癌的治疗提供新的策略。方法:人NSCLC细胞株A549常规传代培养于含10%FBS、100 U/ml青霉素和100 mg/L链霉素的RPMI-1640培养基中。采用CCK-8法分析不同浓度的DDP(3.125、6.25、12.5、25、50 μM)、RSV(2.5、5、10、20、40 μM)单用以及RSV(2.5μM)联合DDP对A549细胞活力的抑制作用。采用等效线图解法评价RSV联合DDP的作用效果。将A549细胞分为Control组(空白培养基)、RSV 组(终浓度为 2.5 μmol/L)、DDP 组(终浓度为 20 μmol/L)、RSV+DDP组(终浓度为RSV 2.5 μmol/L+DDP 20 μmol/L)进行药物处理24 h。采用Hoechst染色、流式细胞术检测每组细胞凋亡情况。采用透射电子显微镜、细胞免疫荧光法检测每组细胞自噬情况。采用蛋白质印迹法(Western blot)检测A549细胞Bax、Bc1-2、P-Akt、Akt、LC3-I/II和P62蛋白表达水平的变化。使用自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine，3-MA)干预,检测细胞凋亡和自噬之间的关系。结果:1、CCK-8结果显示,RSV、DDP以及RSV联合DDP均呈浓度依赖性抑制A549细胞活力;RSV、DDP以及RSV联合DDP对A549的IC50值分别为8.3μM、24.04μM和12.8μM;等效线图解法提示,RSV增强DDP对A549细胞活力的抑制,且具有协同效应;2、Hoechst染色显示RSV联合DDP可致细胞染色质浓缩,体积变小、变形,细胞核固缩,呈亮蓝色,凋亡的细胞增多;3、流式细胞术检测发现,与Control组相较,RSV组细胞凋亡率差异无统计学意义(2.33±0.41%vs 2.5±0.420%,p＞0.05);DDP组、RSV+DDP组细胞凋亡率明显高于对照组(12.98%±0.84%、17.12%± 1.10%vs 2.33 ±0.41%,p ＜0.05);RSV+DDP 组细胞凋亡率明显高于 DDP 组(17.12%± 1.10%vs 12.98%± 0.84%,P<0.05)；4、透射电子显微镜发现,RSV联合DDP作用后,促进A549细胞自噬小体形成;5、细胞免疫荧光结果显示RSV联合DDP提高A549细胞自噬活性;6、Western blot检测显示,与Control组相较,DDP组和RSV+DDP组凋亡相关蛋白Bax水平明显增高、Bc1-2水平明显下降,自噬相关蛋白LC3-II水平明显升高、P62水平明显降低以及Akt的磷酸化水平明显下降(p＜0.05),与DDP组相较,RSV+DDP组Bax、LC3-II表达明显升高,Bc1-2、P62以及Akt的磷酸化水平明显下降(P＜0.05);7、加入3-MA,可显著抑制RSV联合DDP所诱导的A549细胞凋亡(P ＜ 0.05)。结论:RSV可增强DDP对A549细胞的抗肿瘤作用,且具有协同效应；其抗肿瘤效应一方面是通过上调Bax,下调Bc1-2表达,另一方面通过上调LC3,下调P62表达以及Akt的磷酸化水平。提示RSV增强DDP的抗肿瘤效应可能通过诱导A549细胞自噬和凋亡来实现。