爪趾皮肤炎对富集笼养蛋鸡行为、免疫和应激的影响

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爪趾皮肤炎是家禽爪趾和足底表面的接触性皮炎,是家禽最常见的爪趾健康问题之一,对其福利和健康都产生了负面影响。目前对以蛋鸡爪趾皮肤炎为代表的爪趾损伤的研究相对匮乏,其对蛋鸡福利水平和生理状态的影响需要较为深入的系统性研究。本试验聚焦爪趾皮肤炎对蛋鸡行为、福利、免疫和应激反应的影响,以爪趾皮肤炎蛋鸡的组织病理学以及免疫和应激基因的表达变化为研究重点,探究爪趾皮肤炎对蛋鸡福利和生理的影响,为蛋鸡生产上防控爪趾损伤提供理论依据。本试验选择60只48周龄海兰褐蛋鸡,单只饲养于富集笼至55周龄,蛋鸡分为三组:爪趾评分0分组(正常爪趾)、爪趾评分1分组(爪趾角化过度,肿胀)和爪趾评分2分组(爪趾表皮坏死或糜烂)。记录爪趾皮肤炎蛋鸡和正常蛋鸡的生产性能和蛋品质,并在51和55周龄分别进行连续2天的行为录像观察,行为录像观察后进行紧张不动性试验和旷场试验。最后剖检试验鸡只,从表观和微观角度研究爪趾组织结构形态变化,并从免疫相关因子(细胞因子、Toll样受体、防御肽)和应激相关因子(氧化应激相关基因和热休克蛋白反应家族因子)在爪趾皮肤炎患处皮肤、脾脏、肝脏和小肠的表达变化角度探究爪趾皮肤炎对蛋鸡的影响。试验结果发现,0分爪趾蛋鸡占比24%,爪趾皮肤炎1分蛋鸡占比46%,2分占比30%。爪趾皮肤炎对蛋鸡生产性能无显著影响(p>0.05),与正常爪趾组相比,爪趾皮肤炎蛋鸡体重较大(p<0.05)。51周龄爪趾皮肤炎蛋鸡的蛋白高度、哈氏单位显著降低(p<0.05),55周龄时蛋品质差异不显著(p>0.05)。蛋鸡行为观察结果表明,爪趾皮肤炎造成蛋鸡的羽毛修饰行为表达减少(p<0.05),但对其他事件性行为(啄物、啄趾、往返踱步、舒适行为)无显著影响(p>0.05)。行为学测试(紧张不动性试验、旷场试验测试)结果表明,爪趾皮肤炎对蛋鸡恐惧情绪和焦虑情绪无显著影响(p>0.05)。爪趾影像和组织学观察结果显示,与正常爪趾相比,1分和2分爪趾温度降低,皮肤组织表皮的角质层和棘层增厚,棘层中可见角小管,随着炎症程度加深,皮肤组织可见表皮大面积坏死,细胞核碎裂,胞质崩解,损伤侵及真皮层,进一步研究发现皮肤组织深度显著增厚(p<0.05)。免疫相关因子的检测结果表明,与0分组相比,1分、2分组爪趾皮肤、肝脏COX-2、PTGEs、i NOS、NF-k B的mRNA相对表达量增加(p<0.05),小肠COX-2、PTGEs、i NOS的mRNA表达量降低,NF-k B表达量增加(p<0.05);脾脏COX-2、i NOS的mRNA表达量增加,PTGEs表达量降低(p<0.05),NF-k B的mRNA相对表达量差异不显著(p>0.05)。爪趾、肝脏和脾脏免疫细胞因子IL-2、IL-4、IL-6、IL-8、IL-10、IL-17、IL-1β、IFN-γ、TNF-α和免疫球蛋白Ig A、Ig G的mRNA相对表达差异显著(p<0.05),均呈上升趋势;小肠IL-4、IL-6、IL-8、IL-10、IL-17、Ig A、Ig G、IFN-γ、TNF-α表达量增加,IL-1β表达量降低(p<0.05)。爪趾、肝脏、小肠和脾脏TLR2、TLR4、TLR5、TLR7、TLR15的mRNA相对表达量均增加(p<0.05)。爪趾和脾脏的防御肽基因表达结果显示,Av BD1、Av BD3、Av BD4、Av BD5、Av BD6、Av BD7、Av BD8、Av BD9、Av BD10、Av BD11、Av BD12、Av BD13、Av BD14和LEAP2的mRNA相对表达量显著升高(p<0.05),且爪趾的Av BD2相对表达量上升,但脾脏的Av BD2mRNA表达量降低(p<0.05);肝脏防御肽基因Av BD2、Av BD3、Av BD4、Av BD5、Av BD7、Av BD8、Av BD11、Av BD12、Av BD13、Av BD14、LEAP2的mRNA相对表达量增加,Av BD6、Av BD9、Av BD10的mRNA相对表达量降低(p<0.05);小肠Av BD1、Av BD3、Av BD5、Av BD6、Av BD7、Av BD9、Av BD10、Av BD12、LEAP2mRNA相对表达量升高(p<0.05),而Av BD2、Av BD8、Av BD14的mRNA相对表达量下降(p<0.05),且Av BD11、Av BD13mRNA相对表达量先增加后降低(p<0.05)。应激相关因子的检测结果表明,与0分组相比,1分、2分组爪趾n NOS、e NOS、NQO1、SOD3、GST、GCLC、HO-1的mRNA表达量增加,SOD1、SOD2、CAT的mRNA表达量降低(p<0.05);肝脏e NOSmRNA的表达量降低,n NOS、NQO1、SOD3、SOD1、SOD2、GST、GCLC、CAT、HO-1的mRNA表达量上升(p<0.05);脾脏n NOS、NQO1、SOD1、SOD2、SOD3、GST、GCLC、HO-1的mRNA表达量增加(p<0.05),e NOS、CAT的mRNA表达量差异不显著(p>0.05)。热休克蛋白调节因子(HSFs,包括HSF1、HSF2、HSF3)和热休克蛋白(HSPs,包括HSP10、HSP25、HSP27、HSP40、HSP60、HSP70、HSP90、HSP110)的研究表明,爪趾皮肤炎患处皮肤组织的HSFs、HSPs的mRNA表达量均显著升高(p<0.05);肝脏HSF2的mRNA表达量增加(p<0.05),且HSPs的mRNA表达量显著升高(p<0.05);脾脏HSF1、HSF2的mRNA表达量增加(p<0.05),且HSPs的mRNA表达量均显著增加(p<0.05);小肠HSF1的mRNA表达量增加,HSF2的mRNA表达量降低(p<0.05),HSP10、HSP25、HSP27、HSP40的mRNA相对表达量增加,HSP70、HSP90、HSP110的mRNA相对表达量先增加后降低(p<0.05)。因此,通过本试验得出爪趾皮肤炎对蛋鸡生产性能影响不显著,但爪趾皮肤炎蛋鸡的体重相对较大,内部蛋品质质量相对较低。爪趾皮肤炎蛋鸡羽毛修饰行为表达降低,除此之外,爪趾皮肤炎对蛋鸡其他事件性行为、紧张不动性静止时间和旷场试验的各项指标均不产生影响。与正常爪趾相比,爪趾皮肤炎患处的爪趾温度较低且皮肤组织微观结构受到不同程度破坏。爪趾皮肤炎患处皮肤组织免疫相关因子(细胞因子、TLRs和防御肽)和应激相关因子(热休克蛋白反应系统和氧化应激相关因子)相对表达量均增加,而肝脏、小肠、脾脏组织中所检测的部分免疫和应激因子表达升高,因此,爪趾皮肤炎蛋鸡可能长期处于慢性应激状态,造成免疫亢进和应激相关因子的表达稳态失衡。
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