【摘 要】
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目的: 神经细胞被认为是一种终末细胞,哺乳动物和人中枢神经系统的神经元在出生后不久就丧失再生能力,因此中枢神经系统损伤后的恢复相当困难。随着干细胞研究的进展,这一认
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目的: 神经细胞被认为是一种终末细胞,哺乳动物和人中枢神经系统的神经元在出生后不久就丧失再生能力,因此中枢神经系统损伤后的恢复相当困难。随着干细胞研究的进展,这一认识面临重大挑战。近年来已经相继从啮齿类动物和人的胚胎及成年脑组织中发现、分离和纯化出神经干细胞(neural stem cell ,NSC)。神经干细胞是具有多分化潜能和自我更新能力的原始祖细胞。从胚胎脑组织分离、纯化的神经干细胞不仅能促进神经元的再生、脑组织的修复,而且通过基因操作,用神经干细胞可作为载体用于某些神经系统疾病的基因治疗。但是,神经干细胞的很多方面如神经干细胞如何最优化培养,如何合理诱导分化等诸多难题仍然有待解决。本试验旨在探索不同条件对大鼠胚胎神经干细胞增殖的影响,以找到培养大鼠胚胎神经干细胞的最佳方法和条件。 方法: 将孕14天的SD大鼠引颈处死后,无菌条件下取出胎鼠的纹状体,剪碎后以机械吹打法制成单细胞悬液,用无血清培养法在基础培养基为DMEM/F12的培养液中进行培养,培养基中加入表皮生长因子(epidermal growth factor, EGF)和碱性成纤维细胞生长因子(basicfibroblast growth factor, bFGF)生长因子,观察不同阶段的神经干细胞生长情况。用胎牛血清促进分化,观察不同阶段细胞形态并用免疫荧光技术鉴定神经干细胞。在不同浓度的EGF,bFGF中观察细胞的增殖
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