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目的：在体外细胞水平从细胞自噬角度探讨卵巢癌耐药的发生机制,检测自噬调节基因HMGB1和P62在卵巢癌中的表达。免疫组化检测耐药相关基因BRCA1和自噬调节基因HMGB1和P62在上皮性卵巢癌中的表达情况,分析其表达与组织学分级、FIGO分期、化疗耐药的关系以及两两之间表达的相关性,了解BRCA1、HMGB1和P62在卵巢癌中的表达、生物学行为及其预后的关系；进一步阐明卵巢癌中细胞自噬相关基因]HMGB1和P62与耐药基因BRCA1的关系,探讨卵巢癌耐药的机理,为指导临床选择合适的治疗方案、判断预后以及寻找有效的逆转肿瘤耐药方法提供理论依据。方法：(1)采用CCK-8法检测不同浓度顺铂(cisplatin, DDP)对SKOV3及SKOV3/DDP细胞的抑制作用,以及用半定量PCR (Semi-quantitative PCR, RT-PCR)、Western Blotting等技术,检测HMGB1和P62的表达。(2)采用免疫组织化学方法检测BRCA1、HMGB1和P62在良性上皮性卵巢肿瘤组织、交界性肿瘤及上皮性卵巢癌组织中的表达。其中良性上皮性卵巢肿瘤组织13例；卵巢交界性肿瘤组织8例；上皮性卵巢癌组织共39例,其中浆液性腺癌23例、粘液性腺癌4例、子宫内膜样腺癌5例、透明细胞癌5例、混合性癌2例。组织学分级：高分化8例、中低分化31例。(2012年)FIGO分期为：Ⅰ-Ⅱ期19例,Ⅲ-Ⅳ期20例；铂敏感26例,铂耐药13例；(3)用SPSS19.0软件对所得数据进行处理,采用χ2检验和Spearman等级相关分析对数据进行统计学分析。P<0.05具有统计学意义。结果：1.不同浓度DDP处理SKOV3及SKOV3/DDP细胞后,均有抑制细胞生长及促凋亡作用,且呈时间和剂量依赖性。研究发现HMGB1 mRNA和蛋白在SKOV3/DDP细胞中的表达低于SKOV3细胞。P62 mRNA和蛋白在SKOV3/DDP细胞中的表达也低于SKOV3细胞。2.免疫组化结果显示BRCA1蛋白位于细胞核中,呈棕褐色颗粒；而P62蛋白表达定位于胞浆中,呈棕褐色颗粒：HMGB1蛋白位于细胞胞核及部分胞浆,呈棕褐色颗粒。3. BRCA1蛋白的表达：在13例卵巢良性肿瘤组织中BRCA1蛋白表达阳性的有7例(53.8%)；8例卵巢交界性肿瘤中BRCA1蛋白表达阳性的4例(50%)；39例上皮性卵巢癌组织中表达阳性的有8例(23.1%)。上皮性卵巢癌组织中BRCA1蛋白的表达水平明显低于良性肿瘤及卵巢交界性肿瘤组织,有显著性差异(χ2=6.440,P=0.040<0.05)。BRCA1表达与临床病理学特征无显著相关性(P>0.05)。在上皮性卵巢癌中BRCA1蛋白在铂敏感卵巢癌的阳性表达低于耐药卵巢癌,具有极显著的差异(χ2=7.863,P=0.005<0.01)。4. HMGB1蛋白的表达：HMGB1在卵巢恶性肿瘤组织、卵巢癌交界性肿瘤、卵巢良性肿瘤组织中的阳性表达率分别为97.4%(38/39)、100%(8/8)、92.3%(12/13)。在不同卵巢组织中,HMGB1表达阳性率无显著差异(P>0.05)。HMGB1表达与肿瘤组织类型有关(P<0.05),与其它临床病理学特征无显著相关性。HMGB1蛋白在铂敏感和耐药性上皮性卵巢癌中无统计学意义。5.P62蛋白的表达：P62在卵巢恶性肿瘤组织、卵巢癌交界性肿瘤、卵巢良性肿瘤组织中的阳性表达率分别为53.8%(21/39)、50%(4/8)、0%(0/13)。上皮性卵巢癌组织中P62蛋白的表达水平明显高于良性肿瘤及卵巢交界性肿瘤组织,有显著性差异(χ2=11.117,P=0.004)。P62表达与肿瘤分期有关,而与其它临床病理学特征没有显著相关性。上皮性卵巢癌中P62蛋白在铂敏感中的阳性表达率高于耐药卵巢癌,有显著差异性(χ2=6.174,P=0.013)。6.在卵巢癌组织中,BRCA1和P62蛋白表达呈负相关(r=-0.399,P=0.012)。结论：1. HMGB1 mRNA和蛋白在SKOV3/DDP中的表达率下调,HMGB1在两种细胞中呈无或弱相关性,HMGB1可能与卵巢癌耐药无关。P62 mRNA和蛋白在SKOV3/DDP中的表达率也下调。提示P62表达水平的变化在铂耐药卵巢癌中扮演着一定的角色,并可能与上皮性卵巢癌铂耐药的发生、发展相关。2.上皮性卵巢癌中BRCA1蛋白在铂敏感卵巢癌的阳性表达低于耐药卵巢癌,说明BRCA1蛋白可能介导卵巢癌耐药的发生、发展过程。3. HMGB1蛋白表达在不同卵巢组织和铂敏感卵巢癌及耐药卵巢癌中无明显差异,可能与卵巢癌耐药过程无关。HMGB1表达与肿瘤组织类型有关,说明HMGB1可能参与了卵巢癌的发生有关。4.P62蛋白的表达与卵巢癌临床分期有关,提示P62可能与卵巢癌的发展有关；上皮性卵巢癌中P62蛋白在铂敏感卵巢癌的阳性表达高于耐药卵巢癌,说明P62蛋白可能参与卵巢癌耐药的发生发展过程。5. BRCAl和P62在卵巢癌中的表达呈负相关,P62阳性表达越高,BRCA1阳性表达则越低。两者可能共同参与了卵巢癌的疾病恶性进展过程及不良预后,对卵巢癌的预后及术后的治疗可能有一定的指导作用。并且BRCA1和P62可作为预测上皮性卵巢癌铂耐药的标志性蛋白。