昆虫离体培养细胞抗菌肽的诱导、纯化与鉴定

来源 :华中师范大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:fuyaomama
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近年来,国外科学家成功地从十几种昆虫细胞系中诱导、分离和鉴定了多种抗菌活性物质,从而证明了利用离体细胞系来研究昆虫免疫的可能性及适应性.该论文正是从这一崭新的角度来研究昆虫的免疫,探讨建立一个通用的体外快速诱导筛选、快速分离纯化及鉴定的技术体系,并将其延伸到其它动物细胞系.通过研究,该实验筛选到一株诱导抗菌活性较高的昆虫细胞系,并从中分离纯化出一种新的抗菌活性较广的抗菌肽.实验选取三种离体培养的鳞翅目昆虫细胞系:甜菜夜蛾(Spodoptera exigua)血细胞系SE(简称SE),斜纹夜蛾(Spodoptera litura)卵细胞系SL(简称SL),粉纹夜蛾(Trichoplusia ni)卵细胞系克隆株BTI-Tn-5B1(简称5B1),用热灭活的大肠杆菌对其进行诱导,并做活性检测、诱导动力学研究及电泳分析.采用10种动物病源细菌、1种酵母菌和8种植物病源真菌作为检测指示菌,测定5B1细胞诱导抗菌肽的抗菌谱,结果发现该抗菌肽的抗菌谱较广,对大部分检测菌有不同程度的抑制作用,从而说明这是一种既抗细菌又抗真菌的抗微生物肽.然后对粉纹夜蛾5B1细胞诱导产生的抗菌肽进行分离、纯化和鉴定.
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