蚕豆萎蔫病毒胞间运动管状结构及植物原生质体骨架标记技术研究

来源 :浙江大学农业与生物技术学院 浙江大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:bianyitijie
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
蚕豆萎蔫病毒2号(Broad bean wilt virus2,BBWV2)在我国广泛发生,对许多经济作物造成严重危害。为了弄清BBWV2在寄主植物体内的细胞间转运机制,本论文应用电子显微镜对BBWV2的细胞病理结构进行了观察,并应用免疫胶体金标记技术对病毒运动蛋白VP37进行了亚细胞定位。为了进一步研究植物细胞骨架与病毒胞内运输的关系,分别以烟草BY-2悬浮培养细胞和蚕豆叶肉细胞为材料,制备了两种细胞的原生质体,初步建立了原生质体细胞微管和微丝骨架的标记方法,并研究了抑制剂Oryzalin和Latrunculin B处理对细胞骨架的影响。以上工作取得的主要结果如下:   将BBWV2的分离物PVl31接种昆诺藜(Chenopodium quinoa),透射电镜下观察感病细胞的超薄切片,发现PV131主要引起三种典型细胞病变:膜结构增生、细胞质内病毒结晶体、细胞质中的管状结构聚集体。此外在胞间连丝处发现了穿越细胞壁的小管结构,病毒粒子排列其中,证明了BBWV2的胞间运动机制与同科的豇豆花叶病毒和葡萄扇叶病毒类似,完整病毒粒子通过胞间连丝处小管进行运输。而细胞质中的管状结构由病毒粒子组成,仅是病毒的一种聚集方式,与病毒的胞间运动无关。利用免疫胶体金标记技术研究了VP37蛋白在感病细胞内的定位,胶体金颗粒主要分布于细胞质内和细胞壁胞间连丝处小管结构上,说明VP37蛋白是小管结构的主要成分。   用酶解法分别制备了烟草BY-2悬浮培养细胞和蚕豆叶肉细胞的原生质体,所得原生质体形态完整,活力高。用TRITC-鬼笔环肽对微丝骨架进行荧光染色,激光共聚焦显微镜显示了原生质体中微丝精细排列的均匀网络结构。用10μmol/L和20μmol/L的Latrunculin B处理原生质体,共聚焦成像显示了微丝解聚和微丝骨架分布的动态过程。用小鼠β微管蛋白单克隆抗体间接免疫荧光标记原生质体中的微管骨架,共聚焦成像显示了清晰的均匀网络结构,用10μmol/L的微管解聚剂Oryzalin处理原生质体l小时后,微管骨架被完全破坏,只能看到点状荧光斑点或极少量的丝状片段结构。以原生质体为材料建立的微丝和微管骨架标记方法,为进一步研究植物细胞骨架功能以及病毒的胞内运输奠定了基础。
其他文献
期刊
[热点述评]一个人穿什么样的衣服出门,已经不仅仅是衣服的问题了,在着装背后,透露出穿着者的审美取向、文化素养、身份地位,以及他对当下流行文 [Hot comments] a person to
番茄是世界上广泛种植的蔬菜之一,由于其具有较高的营养价值而受到广大消费者的普遍欢迎。目前,随着国外番茄品种的不断引进,番茄灰叶斑病在我国发生越来越重。该病害主要危害番
20年后的一场别开生面的时装表演正在进行着.数十位打扮入时的模特儿逐一登台亮相,引起观众的阵阵掌声.不过,观众感兴趣的并不是款式新颖的时装,而是身上佩戴的一些五颜六色
近10年来,B型烟粉虱Bemisia tabaci入侵到全球许多国家和地区,已成为世界性的重要害虫。最近几年,另一种入侵型烟粉虱—Q型烟粉虱也正从起源地迅速扩散世界其他一些地方,并在很多
说明:1、睿信基金评级所用数据均为可获得的公开数据,睿信基金评级选取具有2年以上历史的基金(包括开放式基金)予以评级,睿信综合评级结果最好的为5星级,最后的是1星级。2、
小麦根腐线虫在国外已经成为小麦生产上的重要病害,对小麦生产构成严重威胁,国内关于其他作物的根腐线虫病害也陆续有所报道,在河南农业大学科教园区试验田已经发现根腐线虫
瑞香狼毒(Stellera chamaejasme)为瑞香科狼毒属植物,主要生长在高山和草原,在中国主要分布于东北、华西、西南、西北(史志诚等,1997),其性味苦平,有大毒,本论文对瑞香狼毒提取物中具有杀螨活性物质进行了分离纯化,对其毒杀的朱砂叶螨的超微结构进行电镜观察及体内几种酶活性的变化进行测定,初步明确了瑞香狼毒提取物对螨类的作用机理。试验结果如下:(1)采用石油醚、氯仿、甲醇三种不同极性
樟巢螟(Orthaga achatina Butler)是一种重要的园林植物害虫,近年在南方一些省份的发生和危害严重,传统的化学防治效果不尽人意;加之园林景观树种上害虫防治的特殊要求,急需开
生物源农药就是利用有益的微生物或微生物的代谢产物制作加工而成,是有益农业微生物应用领域中的重要研究对象。土曲霉(Aspergillus terreus)是一种普遍存在于自然环境中的真