四妙勇安汤治疗肢体缺血性疾病的实验研究

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目的:通过建立大鼠急性后肢缺血模型,研究中药四妙勇安汤对急性后肢缺血大鼠肿瘤坏死因子(TNF-α)及白细胞介素-1β(IL-1β)等炎性细胞因子及新生血管情况的影响,为临床应用四妙勇安汤的提供理论支持。材料与方法:取成年Wistar大鼠(200±20g)32只,制成后肢缺血模型,按随机数字表分成两个大组:实验组与模型对照组,每组再按标本采集时间分为术后2周、4周两个亚组,每个亚组均为8只大鼠。另取8只大鼠作为正常对照。实验组每天灌胃中药四妙勇安汤,模型对照组每天灌胃相同量的生理盐水,正常对照组自由饮食。2周时断头处死2周实验及模型、正常对照组,4周时处死剩余大鼠,均取血清用酶联免疫法(ELISA)检测血清中肿瘤坏死因子(TNF-α)及白细胞介素-1β(IL-1β)的含量,取股动脉结扎侧内收肌一块,制成石蜡切片,HE(苏木素-伊红)染色观察一般组织形态的变化,用免疫组化法检测缺血肌肉中血小板-内皮细胞粘附分子(CD31)的表达,明确在四妙勇安汤的作用下,缺血肌肉中血管新生的变化情况。结果:实验动物无死亡,足趾坏死3例。TNF-α均有所增加,但同时期服用中药的实验组明显低于模型对照组(P<0.05),4周时与正常对照组无明显差异(P>0.05)。IL-1β明显升高,模型对照组2周及4周时均明显高于正常对照组及实验组(P<0.01),实验组未见明显升高,与正常对照组无显著差异(P>0.05)。模型对照组缺血肌肉内CD31阳染的内皮细胞无明显增加,4周时模型对照组与正常对照组仍无显著差异(P>0.05),实验组内收肌内CD31阳染的内皮细胞均明显多于同期模型对照组(P<0.01)。服用中药的实验组在2周与4周时TNF-α、IL-1β、CD31均无明显差异(P>0.05)。结论:急性肢体缺血时,TNF-α、IL-1β等炎性细胞因子明显增加,缺血肢体新生血管无明显增加。中药四妙勇安汤能够抑制TNF-α、IL-1β等炎性细胞因子的产生,促进缺血肢体新生血管的生成,能有效加速侧枝循环的建立,且在2周时效果最为显著,证明四妙勇安汤确实有降低炎症反应,具有促进血管内皮细胞增殖的促血管生成等作用。
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