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第一部分人脑胶质瘤中重要凋亡相关蛋白表达的研究目的研究人脑胶质瘤组织中重要凋亡相关蛋白Survivin、p53、Caspase-3、Caspase-7 的表达,探讨其与细胞凋亡、增殖的关系。方法采用免疫组化SP 法检测了Survivin、p53、Caspase-3、Caspase-7 在48 例人脑胶质瘤和8 例正常脑组织中的表达情况。TUNEL 技术用于检测组织中细胞凋亡现象,Ki-67 增殖指数的检测则采用SABC 法。结果胶质瘤组织中的Survivin、p53、Caspase-3、Caspase-7 阳性率均高于正常脑组织组(P<0.01), 分别达56.2%、52.0%、70.8%、68.8%。Survivin、p53 的表达水平随着肿瘤恶性程度的升高有增高趋势(P<0.01)。Caspase-3、Caspase-7的表达与肿瘤的级别之间无等级相关性,但Caspase-3、Caspase-7 之间存在协同表达现象。Survivin、p53、Caspase-3、Caspase-7 表达阳性标本中的凋亡指数(AI)和Ki-67指数(Ki-67 LI)高于阴性标本(P<0.01),而且,Ki-67 指数随着恶性度升高有增高趋势。结论Survivin、p53、Ki-67 LI 的表达水平能直接反应胶质瘤的恶性生物学行为。Caspase-3、Caspase-7 在凋亡过程中可能存在联合作用机制。胶质瘤组织中细胞凋亡和细胞增殖之间不一定存在平行关系。 第二部分特异性siRNA 对人脑胶质瘤细胞Survivin 基因表达的抑制作用目的Survivin 属IAP 基因家族成员,表达于多种肿瘤组织中,能使细胞逃避凋亡,并促进细胞的异常有丝分裂。本研究旨在探讨siRNA 敲除Survivin 基因的可行性,并观察其对人脑胶质瘤细胞凋亡的影响。方法采用人工合成的小干扰RNA(siRNA)体外阻抑胶质瘤细胞的Survivin 基因,即时定量PCR 方法检测Survivin mRNA 表达水平,流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果Survivin siRNA 转染后24小时,T98、SF767 细胞中Survivin mRNA 表达水平同阴性对照相比,下调分别达92.6%、89.5%,48 小时后表达量则下降了80.1%、67.6%。T98 细胞在干扰后24、48小时平均凋亡率分别达50.2%、38.4%,SF767 分别达40.1%、25.6%,同阴性对照相比有显著差异(P<0.01)。结论针对Survivin 的siRNA Oligo 能有效抑制