烧伤大鼠血清对血管内皮细胞通透性影响

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目的 探讨烧伤大鼠血清对血管内皮细胞通透性的影响及作用机制方法 将SD大鼠随机分为6组,每组10只,分别为正常组、烧伤2h、4h、8h、12h和24h组。采取沸水烫伤法复制大鼠烧伤模型,通过尾静脉注射2%伊文思蓝,留取心、肝、肺、肾、空肠和回肠组织,比色法检测各组织中伊文思蓝含量,比较分析烧伤大鼠血管通透性变化;ELISA法检测各组大鼠血清中HIF-1α和ET-1含量,并将其与大鼠血管通透性进行相关性分析。将原代培养的大鼠主动脉内皮细胞根据是否应用烧伤血清干预分为正常组和血清干预组,血清干预组应用烧伤12 h大鼠血清干预大鼠主动脉内皮细胞24 h,应用细胞通透性实验检测单层细胞膜通透性变化,实时荧光定量PCR(RT-PCR)和Western blot分别检测细胞通透性相关基因内皮素-1(ET-1)、内皮因子受体A(ETA)、内皮因子受体B(ETB)和带状闭合蛋白1(ZO-1)的mRNA和蛋白表达的变化。结果 (1)与正常组相比,烧伤组大鼠伤后2h、4h、8h、12h和24h心、肝、肺、肾、空肠和回肠组织中伊文思蓝含量均升高,并于12h达高峰(P<0.01)。同时,烧伤组大鼠伤后不同时间点血清中HIF-1α和ET-1也增高,并于12h达到高峰(P<0.01),伤后不同时间点HIF-1α和ET-1变化分别与心、肝、肺、肾、空肠和回肠组织的尹文思蓝变化呈正相关(P<0.01)。(2)与正常组相比,烧伤大鼠血清干预组血管内皮细胞通透性系数明显升高(P<0.01),血清干预组ET-1、ETA和ETB的mRNA和蛋白表达均显著升高(P<0.01)、ZO-1的mRNA和蛋白表达明显降低(P<0.01)。结论 (1)烧伤后血管的通透性增加可能与HIF-1α、ET-1有关。(2)烧伤大鼠血清可引起血管内皮细胞通透性的增加,通透性增加可能与ET-1、ET-A、ET-B表达升高和ZO-1表达降低有关。
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