薏苡仁提取物穴位注射对周围神经再生影响的实验研究

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目的:筛选能促进周围神经损伤后神经再生的薏苡仁有效部位。 方法:首先进行薏苡仁药物成分的提取,分为粗提和精提两部分,共提取出24种药物成分;其次原代分离纯化培养幼龄大鼠坐骨神经主干处的雪旺细胞,观察0.5μg/ml、1.0μg/ml、2.0μg/ml、4.0μg/ml不同浓度的石油醚组、正丁醇组、水提液NKA60%组、水提液AB860%组、70%醇提乙酸乙酯组、90%醇提乙酸乙酯组、90%醇提90%ETOH组对雪旺细胞活力和雪旺细胞神经生长因子(NGF)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)mRNA表达的影响;最后构建幼年大鼠坐骨神经钳夹损伤模型,将初步筛选出的薏苡仁提取物中石油醚组、NKA60%ETOH组、70%醇提乙酸乙酯组和90%醇提90%ETOH组制成注射液进行穴位注射,以坐骨神经纵行切片的形态学(HE染色、银染及神经纤维超微结构分析)观察,腓肠肌肌细胞面积,坐骨神经诱发电位等为观察指标,分析这些药物成分穴位注射对坐骨神经再生的影响。结果:1.石油醚提取组2.0μg/ml和4.0μg/ml浓度条件下、正丁醇提取组2.0μg/ml浓度条件下、水提液NKA60%提取组1.0μg/ml浓度条件下、水提液AB860%提取组4.0μg/ml浓度条件下、70%醇提乙酸乙酯组4.0μg/ml浓度条件下、90%醇提乙酸乙酯组和90%醇提90%ETOH4.0μg/ml浓度条件下能明显提高雪旺细胞的活力; 2.石油醚提取组、水提液NKA60%提取组和90%醇提90%ETOH组能明显促进雪旺细胞神经生长因子(NGF)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)mRNA的表达,表现为基因全部上调;正丁醇提取组能促进雪旺细胞碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)mRNA的表达,其基因上调;70%醇提乙酸乙酯组和90%醇提乙酸乙酯组能促进雪旺细胞神经生长因子(NGF)mRNA表达,其基因上调。 3.70%醇提乙酸乙酯组、石油醚组和水提液NKA60%组在足三里、环跳穴处注射能明显促进大鼠坐骨神经损伤后的再生。神经组织HE染色、银染、神经纤维的超微结构分析及坐骨神经诱发电位结果支持这一结论。90%醇提90%ETOH组穴位注射也有促神经再生的作用。 结论:薏苡仁中提取的药物成分能促进周围神经损伤后的再生,其中,以石油醚组、70%醇提乙酸乙酯组和水提液NKA60%组疗效最好。
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