地锦草抗皮肤癣菌物质基础研究

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地锦草为大戟科(Euphorbiacea)植物地锦EuphorbiahumiusaWilld.和斑地锦Euphorbia macuLaata L.的干燥全草,广泛应用于中、蒙、维医药中。地锦草临床可用于治疗各种皮肤癣病,药理实验证明地锦草提取物具有抗皮癣菌的作用,但是对于其抗真菌的物质基础并未有深入研究。本文结合活性筛选、化学成分分离与鉴定、UPLC-PDA-QTOF-MSn 等技术研究地锦草Euphorbiahumiusa Willd..抗皮肤癣菌的物质基础并探讨活性成分。首先,将地锦草药材乙醇提取物分成不同部位,进行抗真菌活性筛选和UPLC图谱分析,根据相似度评价及活性筛选结果确定地锦草抗皮肤癣菌活性部位。采用正相硅胶、MCI GEL树脂、聚酰胺色谱、ODS反相填料、Sephadex LH-20和制备液相等多种色谱方法从地锦草活性部位分离得到22个单体,并通过理化性质和UV、NMR、MS等波谱数据鉴定了 20个化合物结构。其中黄酮醇类13个:山柰酚(1)、槲皮素(2)、山柰酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(3)、槲皮素-3-O-α-L-呋喃阿拉伯糖苷(4)、槲皮素-3-0-(6"-O-没食子酰基)-吡喃葡萄糖苷(5)、山柰酚-3-O-α-D-吡喃阿拉伯糖苷(6)、山柰酚-3-O-β-D-吡喃木糖苷(7)、山柰酚-3-O-α-L-呋喃阿拉伯糖苷(8)、山柰酚-3-0-(6"-O-没食子酰基)-β-D-半乳糖苷(12)、槲皮素-3-O-{鼠李糖(1→6)-[木糖(1→2)]-半乳糖苷}(14)、芦丁(15)、异槲皮素(16)、槲皮素-3-O-β-D-木糖(1→2)-β-D-葡萄糖苷(18);酚酸类5个:没食子酸乙酯(9)、反式阿魏酸(10)、原儿茶酸乙酯(11)、3,3’-二甲基鞣花酸-4-O-β-D-葡萄糖苷(13)、没食子酸甲酯(17);三萜及甾醇类化合物2个:cycloart-23-ene-3β,25-diol(19)、β-谷甾醇(20)。其中,化合物 5、7、10、11、12、14、18为首次从该植物中分离得到。在此基础上,应用UPLC-PDA-QTOF-MSn技术对醇提物和活性部位的主要成分进行快速表征,共鉴定出59种成分,其中包括44种酚酸类成分,15种黄酮类成分。最后,利用灰关联度分析对地锦草抗皮肤癣菌活性成分进行了初步探讨,结果表明29个化合物与地锦草抗皮肤真菌活性的相关度在0.6以上,其中鞣花酸、山柰酚、槲皮素与活性关联度较高。此外,本文还对地锦草化学成分和药理活性进行了综述。
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