家蚕是探究虫菌互作机制的重要模式昆虫,球孢白僵菌是自昆虫病原真菌试剂研发以来研究最多的广谱性昆虫病原真菌之一,真菌细胞壁是真菌与宿主昆虫相互作用的主要结构,对家蚕免疫机制和球孢白僵菌细胞壁组分的分析能为理解宿主-真菌相互作用的机制提供关键参考信息。本实验对家蚕抵御不同毒力球孢白僵菌的免疫机理和球孢白僵菌细胞壁组分差异对其致病力的影响进行研究,以期对提高昆虫病原真菌的致病力和家蚕等具有经济价值昆虫的免疫力提供理论依据和借鉴意义。研究结果如下:1.家蚕血腔中不同毒力球孢白僵菌菌株的筛选通过对20株球孢白僵菌进行生长速率测定、产孢量测定、蝉翅膜穿透试验和毒力测定,获得了高毒力菌株Bb9、中等毒力菌株Bb20和低毒力菌株Bb6。2.家蚕对不同毒力球孢白僵菌体内免疫应答的转录组分析为了阐明感染不同毒力球孢白僵菌的家蚕基因表达的差异,用RNA-seq技术对感染高、中及低毒力菌株Bb9、Bb20和Bb6的家蚕（分别以HI、MI、LI表示,无菌水为对照组C）进行了转录组分析。结果表明家蚕通过调控不同的基因来抵御不同致病力白僵菌的侵染。与对照组相比,三组被侵染家蚕的大量免疫相关基因差异表达。此外,三组感染的家蚕之间相互比较发现,大量的免疫相关基因在被不同球孢白僵菌侵染的三组家蚕中也差异表达,其中包括免疫识别蛋白BmβGRP4。3.家蚕BmβGRP基因表达分析为探究肽聚糖识别蛋白（βGRPs）在家蚕抵御不同球孢白僵菌菌株时的基因表达谱,通过q RT-PCR技术测定了家蚕BmβGRP1、BmβGRP2、BmβGRP3及BmβGRP4在感染期的基因表达量。结果显示:BmβGRP1、BmβGRP2和BmβGRP3的表达量在被菌株侵染后发生变化,但是变化趋势和菌株毒力之间没有明显相关性;BmβGRP4的表达量在所有样本中随感染时间的延长而增加,并在36 h后下降;重要的是在家蚕感染白僵菌后12 h,BmβGRP4在三组处理中的表达有显著差异:BmβGRP4在低毒力菌株中高水平表达,在中毒力菌株中中等水平表达,在高毒力菌株中低水平表达,这表明BmβGRP4在12 h可能参与了家蚕对不同毒力球孢白僵菌的先天免疫防御。4.不同毒力球孢白僵菌分生孢子细胞壁组分差异分析为明晰不同致病力白僵菌细胞壁组分差异,通过免疫荧光染色方法对高、中、低毒力白僵菌的细胞壁表面几丁质、总几丁质、α-1,6-甘露聚糖、总葡聚糖、α-1,3-葡聚糖、β-1,3-葡聚糖的含量进行分析,结果表明不同毒力菌株的细胞壁组分存在显著差异。同时Bb9-H菌株的β-1,3-葡聚糖含量最低,Bb20-M菌株的β-1,3-葡聚糖含量居中,Bb6-L菌株的β-1,3-葡聚糖含量最高,这与用上述菌株感染家蚕后12 h BmβGRP4的表达一致。5.BmβGRP4识别β-1,3-葡聚糖的家蚕免疫激活分析为了确定β-1,3-葡聚糖量是否诱导了BmβGRP4的表达差异从而激活家蚕的先天免疫,研究了添加β-1,3-葡聚糖和沉默BmβGRP4对球孢白僵菌致病力的影响。结果表明随着β-1,3-葡聚糖注射量的增加,BmβGRP4在家蚕体内的表达量急剧增加,当注射量达到600 ng时BmβGRP4的表达趋于稳定。对家蚕的LT50分析表明,β-1,3-葡聚糖与球孢白僵菌一起注射能降低Bb9-H的致病力,但不能降低Bb20-M和Bb6-L的致病力,而BmβGRP4沉默能增强Bb20-M和Bb6-L的致病力,但不能降低Bb9-H的致病力,不同致病力球孢白僵菌菌株分别与β-1,3-葡聚糖及沉默BmβGRP4侵染家蚕后的LT50差异不显著。这些结果表明球孢白僵菌的致病力受细胞壁β-1,3-葡聚糖含量的影响,并可被BmβGRP4识别。