论文部分内容阅读
Ghrelin(生长素),是一个具有多种功能的激素,它可以促进食物的摄取,肠道的蠕动和胃排空,同时它还可以促进生长激素的分泌。Ghrelin能够结合到生长激素促分泌受体(GHSR)上调控垂体细胞中生长激素的分泌。在本实验中,ghrelin的表达方式通过RT-PCR证明了在斑马鱼胚胎发育到12hpf就已经开始表达了,而采用整体原位杂交技术则最早可以在胰脏中被检测到。为研究ghrelin的功能,用两个特异性吗啡林寡聚核苷酸敲低ghrelin的表达可导致胚胎发育减缓,心腔积水,膘发育缺陷。整体原位杂交实验表明,在敲低ghrelin的斑马鱼胚胎中,垂体中生长激素的表达受到抑制。但是垂体和下丘脑的重要发育调控分子以及垂体中的激素基因的表达方式在相同的时间与对照的斑马鱼胚胎则基本相同,说明了ghrelin特异性的对于垂体中生长激素的表达至关重要。同时运用不同形式的ghrelin mRNA去挽救ghrelin敲低的胚胎的缺陷时发现辛酰基化的ghrelin能够挽救ghrelin吗啡林敲低导致的GH表达抑制的表型,而非辛酰基化的ghrelin mRNA不能挽救该缺陷。而近C-端的ghrelin mRNA片段与ghrelin吗啡林共注射发现其使GH表达抑制的缺陷更严重。这就说明了在斑马鱼ghrelin基因的C端可能存在着与其N-端编码成熟ghrelin多肽功能相拮抗的多肽,抑饥素(obestatin)。