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甜菜夜蛾核多角体病毒(Spodopteraexiguanuclearpolyhedrosisvirus,SeNPV)可有效防治甜菜夜蛾(SpodopteraexiguaHübner)。目前中山大学昆虫学研究所利用该病毒已成功研制了甜菜夜蛾核多角体病毒杀虫剂—“虫瘟二号”,并实施产业化生产,但如何高效低成本增殖该病毒是当前产业化生产中亟待解决的问题。由于利用细胞培养大量增殖病毒成本太高,难以在病毒杀虫剂大规模生产中应用,因此采取人工半合成饲料饲养寄主昆虫增殖病毒是当前国内外普遍使用的方法。就病毒增殖环节而言,主要应提高病毒的感染死亡率和单头寄主病毒含量。影响上述两个指标的因素很多,包括:昆虫品系、感染龄期、毒株、接种浓度、饲料、湿度、温度、光照、收获病毒时间等。就寄主昆虫感染龄期而言,多数研究表明,最适感染龄期在倒数第二龄,但在该龄期感染,幼虫死亡时的生物量或体重并非最大。因此,如何在寄主获得最大生物量后使其感染死亡是进一步提高病毒增殖产量的关键。保幼激素类似物(Juvenilehormoneanalogue,JHA)是一类具有保幼激素活性的化合物,具有调控昆虫变态和生长发育的作用。用JHA处理昆虫幼虫,可阻止幼虫发生变态,延长幼虫期甚至产生超龄幼虫。鉴于此,本文用JHA处理甜菜夜蛾幼虫,以延长幼虫的历期并使虫体相对增大,从而达到提高病毒单位产量的目的,为今后利用JHA高效率、低成本增殖甜菜夜蛾核多角体病毒作为杀虫剂提供理论依据和方法。
分别用2×106,2×107,2×108PIBs/mL三种浓度的SeNPV感染甜菜夜蛾末龄幼虫(第5龄),并用保幼激素类似物methoprene8ug处理(处理剂量为8ug/头),以研究methoprene对SeNPV增殖的影响。结果表明:各处理组较对照组病毒总产量分别提高188%、160%和80%;平均单头病毒含量分别提高126%、119%和37%;病毒感染死亡率分别提高26%、18%和15%。其中以2×107PIBs/mL感染5龄刚蜕皮甜菜夜蛾幼虫,并于感染第1天滴加8μgmethoprene,病毒增殖产量最高,病毒总产量和平均病毒产量分别为4.18×1010PIBs和1.48×109PIBs/头。以幼虫的体重变化、取食量、食物消化率、食物转化率、平均每克虫尸病毒含量为指标,研究了methoprene和病毒对宿主消化生理的影响。结果表明,methoprene处理尽管提高了幼虫取食量,但更显著提高了寄主的食物转化率和每克虫尸的病毒含量。
使用SDS-PAGE及Western-blot方法,分析了methoprene处理对SeNPV多角体蛋白(polyhedron,POLH)在脂肪体中合成的影响。结果表明:methoprene在处理后2-3d可促进幼虫脂肪体中POLH的合成。