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乙肝病毒(HBV)慢性感染严重威胁人类健康,目前主要治疗药物干扰素和核苷(酸)类似物存在有效率低,耐药性和副反应等问题,因此研究免疫治疗可对上述治疗方法进行有效补充。实验室前期研究发现热休克蛋白HSP70、gp96能通过抗原递呈激活特异性T细胞。但由于HSP70、gp96等存在蛋白表达纯化较为困难的问题,因此本研究以乙肝病毒的主要结构蛋白-表面蛋白(HBsAg)和核心蛋白(HBcAg)作为抗原设计DNA疫苗,利用HSP70和gp96 DNA载体同时增强细胞免疫和体液免疫,研究其作为免疫佐剂是否介导乙肝病毒特异性细胞免疫应答。利用酶联免疫斑点实验、流式细胞内因子染色、H3-TdR实验、酶联免疫吸附实验技术分析,结果显示HSP70和gp96可使病毒特异性的细胞免疫水平提高1-6倍,提高体液免疫水平20%~60%。研究结果为设计以HSP70和gp96作为免疫佐剂的新型乙肝治疗性DNA疫苗提供了依据。