【摘 要】
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该文由两部分组成:人直肠癌cDNA消减文库的构建;该研究应用抑制性消减杂交技术,构建人直肠癌与正常直肠差异表达的cDNA消减文库.分别从人直肠癌组织及正常直肠组织中提取总RN
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该文由两部分组成:人直肠癌cDNA消减文库的构建;该研究应用抑制性消减杂交技术,构建人直肠癌与正常直肠差异表达的cDNA消减文库.分别从人直肠癌组织及正常直肠组织中提取总RNA,依次合成单链及双链cDNA,经RsaI酶切成平均大小为400~600bp片段.将直肠癌cDNA分为两组,分别与两种不同的接头连接,再与正常直肠组织的cDNA进行两次消减杂交及两次抑制性PCR后,将产物与T/A载体连接,重组DNA分子转化JM109大肠杆菌后,成功的构建了cDNA消减文库.该文库共有1260个克隆,从中随机挑取38个克隆提取质粒,双酶切分析和进行序列测定,同源性分析.结果表明,有19个基因片段与直肠癌发病相关.该实验结果为进一步研究、筛选直肠癌发病的特异性基因奠定了基础.
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