水稻OsCBP20基因的克隆与功能分析

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非生物逆境影响着水稻的生长、谷物产量与品质,探究不同的逆境信号转导通路对于确保水稻稳产与品质具有非常重要的意义。  RNA结合蛋白(RBP)是植物体内一种重要的蛋白质,已经证明它们参与多种逆境下RNA的转录后调控。本文利用聚合酶链式反应从水稻cDNA文库中克隆到一个逆境应答基因,包含一个典型的RNA识别模块(RRM),编码核帽结合蛋白复合体的20kDa亚基,因此命名为OsCBP20。该基因开放阅读框编码243个氨基酸,预测分子量28.6kDa,等电点5.14。亚细胞定位发现OsCBP20定位在细胞核。半定量RT-PCR分析不同逆境下OsCBP20的表达情况,高温、高盐、干旱诱导该基因表达。融合蛋白表达分析,OsCBP20在大肠杆菌体内高效表达。原核表达逆境分析显示,重组细胞在高盐、干旱、高温条件下生存率比对照细胞高。对T2代转基因水稻植株进行盐胁迫、干旱胁迫以及高温胁迫处理后发现,过量表达水稻植株的存活率明显高于反义抑制表达水稻植株和对照日本晴植株。这说明,OsCBP20可能参与高盐、干旱、高温逆境信号的转导,是一个多逆境调控基因。
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