拟南芥生长素相关突变体的筛选和初步研究

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生长素是植物体内非常重要的一种激素,调控植物生长和发育等生理过程。生长素也是最早发现的植物激素,发现至今已有70多年的历史,然而由于其合成途径的复杂性,目前只确定了一条色氨酸依赖的生长素合成途径:吲哚丙酮酸途径(IPA)。本文主要通过实验室的筛选体系来筛选生长素相关突变体,希望从中筛选到新的生长素合成缺陷突变体,从而补充和完善生长素合成通路。实验室经过长期的探索,建立了一套筛选生长素相关突变体的体系,已经在含有细胞分裂素(ZT)的培养基上筛选到了一株根卷曲(Cytokinin induced root curling1)表型的低生长素突变体ckrc1/taa1。对ckkrc1的研究,在一定程度上阐明了根中生长素与细胞分裂素的作用机理。CKRC1/TAA1编码的色氨酸氨基转移酶(tryptophan aminetransferase,TAA)是IPA途径中的催化色氨酸(Trp)转变为吲哚丙酮酸(IPA)的酶。最近的研究发现,YUCs位于TAA1的下游,YUCs催化IPA转化为吲哚乙酸(IAA)。通过对不同T-DNA突变体库种子的筛选,筛选了约210,000粒种子,筛选到53株根卷曲表型突变体,并主要研究了其中的两个突变体(c5和lb113)。依据生化互补结果将53个突变体中的12个归为aux1类突变体,26个归为eir1/pin2类突变体,5 个归为ckrc 类突变体,2 个归为ckrw(Cytokinininducedroot waving)类突变体,6个根卷曲表型弱的突变体。遗传等位分析试验确定了其中的 c6、c8、lc6、lc15是 eir1/pin2 的等位,le85 和 le4 是 ckrc1 的等位,lb72 是yuc8的等位。研究发现,c5存在许多花丝短的花且其花粉也存在败育现象,导致c5的结实率较低。lb113在MS培养基上生长7天时,主根和下胚轴明显比野生型(WT)短,在土中植株的叶柄短,植株矮小,分蘖多且种子小。种种迹象表明,lb113可能是一个低生长素表型突变体。遗传分离比显示,c5和lb113是隐性突变体。这两个突变体的测序结果已经拿到,图位克隆与激素测定实验也正在进行中。
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