钩藤药材质量评价研究

来源 :沈阳药科大学 | 被引量 : 2次 | 上传用户:shgandang
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中药钩藤为茜草科植物钩藤 exHavil.(UR),大叶钩藤U.macrophylla(Miq.)Miq.ex Havil.(UM),毛钩藤U.hirsuta Havil.(UH),华钩藤 U.sinensis(Oliv.)Havil.(USi)及无柄果钩藤U.sessilifructus Roxb.(USe)的干燥带钩茎枝。钩藤系多基原植物的中药材,是治疗肝风内动、小儿惊痫抽搐要药。本研究对五种基原钩藤的生药学、质量评价方法及生物碱类成分分布等内容进行了深入、系统研究,主要内容如下:1.对钩藤五种基原植物形态进行描述,确定基原植物形态主要鉴别特征。确定五种基原药材的性状鉴别特征,制定药材基原的性状快速鉴别方法。2.利用显微数码成像技术对五种基原钩藤药材的组织构造、显微特征进行系统研究,采用石蜡切片法、冰冻切片法装片,确定五种基原的显微鉴别特征,为钩藤药材品种的组织、显微鉴别提供依据。3.建立了 UPLC-Q-TOF/MS法同时测定钩藤药材中36个成分的定性鉴别分析方法,确定主要生物碱成分的质谱裂解规律及特征碎片离子信息,解析结构与色谱保留行为关系。4.建立了 UPLC-Q-TOF/MS法同时测定钩藤药材中24个生物碱类成分的定量方法。对5种基原22批钩藤药材中指标成分含量进行测定,首次确定钩藤药材指标成分的限量标准,为其质量控制提供参考依据。确定钩藤药材鉴别项指标性成分为IRN(异钩藤碱)、ICO(异去氢钩藤碱)和GME(缝籽嗪甲醚)。提示关注五环吲哚类成分。钩藤药材含量测定指标性成分为钩藤碱(RIN)、毛钩藤碱(HS)。成分含量限量标准为RIN、HS成分含量均不得低于0.03mg/g;两种成分总量不低于0.12mg/g。阐述了五个基原药材生物碱类组分含量的相似性和差异性,为钩藤药材的基原规范化研究提供化学依据。5.进行了钩藤样品UPLC-Q-TOF/MS测定数据的无监督的主成分分析法(PCA)和有监督的偏最小二乘法判别分析(OPLS-DA),确定出对品种分类贡献最大的9个指标成分。分别为钩藤碱,异钩藤碱,异去氢钩藤碱,去氢钩藤碱,柯诺辛碱,iso-RIN,缝籽嗪甲醚,毛钩藤碱和去氢毛钩藤碱。五种基原中,毛钩藤(UH)、无柄果钩藤(USe)与钩藤(UR)、大叶钩藤(UM)、华钩藤(USi)样品中生物碱类成分的种类和含量差异较大。本研究揭示了五种基原药材生物碱活性组分的分布差异,为钩藤药材的质量控制和质量标准化提供了科学依据。6.进行了钩藤药材总氮、灰分、无机元素含量等评价指标和紫外光谱、薄层色谱、液相色谱等评价方法研究。建立五种基原钩藤药材的紫外-可见吸收光谱判别方法,确定特征吸收峰位及吸光度比值;建立钩藤药材的含氮量凯氏定氮测定法、TLC、HPLC鉴别方法;建立钩藤药材中16种无机元素含量ICP-MS测定方法。并通过相关性分析,探索各评价指标关联程度,为完善钩藤药材质量控制标准提供研究依据。
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