siRNA抑制FAT10基因表达对肝癌细胞侵袭和迁移能力的影响

来源 :南昌大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liouxing1984
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目的:应用RNA干扰技术抑制肝癌细胞株MHCC97H和Huh-7中FATl0基因的表达,探讨FATl0基因表达下降,对人肝细胞癌细胞侵袭和迁移能力的影响。为进一步研究肝癌的侵袭和转移机制提供理论依据。方法:1、将针对FAT10基因设计的siRNA序列瞬时转染至人肝细胞癌MHCC97H和Huh-7细胞,运用半定量RT-PCR、荧光定量PCR和western blot检测FAT10mRNA和蛋白的表达变化。2、利用transwell侵袭实验、transwell迁移实验和划痕实验,观察降低FAT10基因表达对肝癌细胞MHCC97H和Huh7体外侵袭和迁移能力的影响。结果:1、将siRNA转染至肝癌MHCC97H和Huh-7细胞,通过半定量RT-PCR和荧光定量PCR检测FAT10mRNA表达明显下调。2、将siRNA转染至肝癌MHCC97H和Huh-7细胞,通过western blot检测FAT10蛋白表达明显下降,且与mRNA下降水平一致。3、降低FAT10基因表达,肝癌细胞MHCC97H和Huh7体外侵袭和迁移能力明显下降。结论:应用siRNA降低MHCC97H和Huh7细胞FAT10基因表达后,能明显降低肝癌细胞MHCC97H和Huh-7的体外侵袭和迁移能力。FAT10可能在肝癌的侵袭和转移过程中发挥重要的调节作用。
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