滇产药用植物贡山三尖杉和西双版纳粗榧的活性成分研究

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三尖杉属(Cephalotaxus)植物有着丰富的化合物类型及良好的药理活性。贡山三尖杉(C. lanceolata)和西双版纳粗榧(C. mannii)为两种产于云南的三尖杉属植物,其活性成分尚未得到充分研究。本文对采自云南怒江高黎贡山和西双版纳地区的贡山三尖杉和西双版纳粗榧新鲜树叶、树干等进行种名鉴定的基础上,通过对两种植物原料分别干燥、粉碎,用工业甲醇常温提取、合并并浓缩提取液,用TLC检测,用氯仿、乙酸乙酯、正丁醇溶剂萃取,用正相柱层析、反相柱层析、Sephadex LH-20柱层析、高效液相色谱等分析手段进行分离纯化,用标准品的理化常数、性质及薄层对照检查,用红外、紫外、质谱、核磁共振谱以及氧化、还原、水解、衍生物制备等化学反应,确定化合物结构,用规范的药理筛选模型和方法对分离到的单体化合物进行活性筛选。从两种植物中共分离得到70个化合物,运用现代波谱学方法鉴定了其中的63个化合物,其中新化合物7个、新天然产物1个。贡山三尖杉共分离得到41个化合物,运用现代波谱学方法鉴定出35个化合物,其中新化合物3个、新天然产物1个,分别为黄酮14个:6-C-methyl-7,4’,4’’’-tri-O-methylamento-flavone (1), apigenin-6-C-methyl-7-O-β-D-glucopyranoside (2), amentoflavone-7,7’’,4’,4’’’-tetramethyl ether (3),7,4’,7’’-tri-O-methyl amentoflavone (4), taiwanhomoflavone A (5), ginkgetin (6),2,3-dihydro-6-methylginkgetin (7),2,3-dihydro-6-methylsequoiaflavone (8), apigenin5-O-α-L-rhamnopyranosyl-(1→3)-β-D-glucopyranoside (9), ladanetin-6-O-β-D-glucoside (10),isoscutellarein7-O-β-D-glucopyronoside (11), apigenin (12), naringenin (13),6-C-methylnaringenin (14);生物碱4个:cephalancin A (15), cephalotaxine,2,11-epoxy-1,2-dihydro-8-oxo-(2α,11α)-9(N)(16), cephalancetine B (17), drupacine (18);内酯2个:11-hydroxyhainanolidol (19), fortunolide A (20);木脂素4个:rel-(7α,8β)-3-methoxy-4’,7-epoxy-8,3’-oxyne-olignan-4,9,9’-triol (21),[3,3’,4,4’-tetrahydro-6,6’-dimethoxy-3,3’-bi-2H-benzopyran]-4,4’-diol (22),(+)-7’(S)-hydroxyarctigenin (23),5-(3’’,4’’-dimethoxyphenyl)-3-hydorxy-3-(4’-hydroxy-3’-methoxybenzyl)-4-(hydroxymethyl)-dihydrofuran-2-one (24);倍半萜5个:dehydrovomifoliol (25),(6R,7E,9S)-9-hydroxy-4,7-megastigmadien-3-one (26),(6R,9R)-9-hydroxy-4-megastigmen-3-one (27), seiricardine A (28), eremopetasinorone A (29);其他成分6个:methyl17-hydroxydocosanoate (30), sitosteryl-3β-glucoside-6’-O-palmitate(31), β-sitosterol (32), daucosterol (33), p-hydroxybenzaldehyde (34),3-methoxy-4-hydroxybenzaldehyde (35)。化合物1、2、15为新化合物,化合物16为新天然产物,化合物10、11、13、21-31、34、35为首次从三尖杉属种植物中分得,其余化合物中除化合物5、17、18、32、33外,其它化合物均首次从贡山三尖杉中分离得到。西双版纳粗榧中分离得到29个化合物,运用谱学分析技术鉴定了其中的28个化合物(新化合物4个),分别为生物碱13个:cephamaninA(36), cephamanin B(37), cephamanin C (38), cephamanin D (39), cephastigiamide A (40),deoxyharringtonine (41), drupacine (42), cephalotaxine (43), epiephalotaxine (44),cephalancetine A (45), cephalotaxine α-N-oxide (46), cephalotaxine β-N-oxide (47),3-epischellhammericine (48);黄酮4个:taiwanhomoflavone A (49), ginkgetin (50),2,3-dihydro-6-methylginkgetin (51), apigenin (52);内酯1个: fortunolide A (53);二萜1个:3β-hydroxy-5,6-dehydrosugiol (54);甾体5个:(5α,20R)-pregn-2-en-20-ol(55),(3β,5α,20S)-20-methylpregnane-3,21-diol (56),(22S)-5α-ergostane-3α,22-diol(57), β-sitosterol (58), daucosterol (59);其他成分6个: ferulyl aldehyde (60),[8]-dehydroshogaol (61), p-hydroxybenzaldehyde (62), methyl6-hydroxytridecanoate(63)。所有化合物均为首次从西双版纳粗榧中分离得到。其中,化合物36、37、38、39为新化合物,化合物54-57、60-63为首次从三尖杉属植物中分离得到。用四氮唑盐(Methyl-Thiazol-Tetrozolium, MTT)还原法,选用HL-60(人白血病细胞株)、SMMC-7721(人肝癌细胞株)、A-549(人肺癌细胞株)、MCF-7(人乳腺癌细胞株)、SW-480(人结肠癌细胞株)对贡山三尖杉和西双版纳粗榧两种植物中分离得到的7个新化合物和1个新天然产物进行细胞毒活性的筛选,在40μM浓度下未表现出体外肿瘤生长抑制活性。
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