【摘 要】
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本试验旨在研究孕激素(P4)和促卵泡素(FSH)对育成母羊卵泡发育、生殖激素分泌以及卵巢组织中相关生殖基因表达的影响,为优化同期发情技术,提高母羊发情及受胎率提供理论基础。选择80只体况相近、发情周期正常、健康的7月龄湖羊母羊,用“P4+PMSG+PGF2α”方案进行发情周期同步化处理,撤栓后选择72只发情同步化较好的母羊进行正式试验,72只母羊按体重随机分为9组,每组8只。撤栓5 d后记为正式试
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本试验旨在研究孕激素(P4)和促卵泡素(FSH)对育成母羊卵泡发育、生殖激素分泌以及卵巢组织中相关生殖基因表达的影响,为优化同期发情技术,提高母羊发情及受胎率提供理论基础。选择80只体况相近、发情周期正常、健康的7月龄湖羊母羊,用“P4+PMSG+PGF2α”方案进行发情周期同步化处理,撤栓后选择72只发情同步化较好的母羊进行正式试验,72只母羊按体重随机分为9组,每组8只。撤栓5 d后记为正式试验的第0d,试验1、2、3组在第0 d埋植P4海绵栓,分别在第5、8、11d撤栓;试验4、5、6组分别于试验第4、7、10 d肌肉注射FSH(早上8:00注射70IU和下午6:00注射30IU);试验7、8、9组进行P4海绵栓+FSH处理,第0d埋植P4海绵栓,埋植时间分别为5、8、11 d,并在第4、7、10d肌肉注射FSH 2次,时间剂量同试验4、5、6组。9组试验羊分别在第0、5、8、11d上午8:00撤栓后静脉采集血液样品,并在第5、8、11 d随机各挑选5只羊撤栓手术采集单侧卵巢(样本采集的第5、8、11 d分别对应黄体前期、黄体中期、黄体后期)。结果表明,P4+FSH处理的小卵泡和总卵泡数量高于P4处理和FSH处理(P<0.05)。处理时间显著影响了小卵泡和总卵泡数量(P<0.05),随着处理时间的延长卵泡数量明显升高,第11 d显著高于第5d和8d(P<0.05);处理及时间交互作用显著影响了小卵泡和总卵泡数量(P<0.05)。各处理组间血清FSH和褪黑素(MT)浓度无差异(P>0.05),不同处理组对血清促黄体素(LH)、催乳素(PRL)、P4和雌激素(E2)浓度影响显著(P<0.05);处理时间对FSH、LH、PRL、P4、E2和MT浓度无影响(P>0.05);处理及时间交互作用显著影响了 P4浓度(P<0.05),对FSH、LH、PRL、E2、MT无影响(P>0.05)。不同处理组对PRL受体(PRLR)、P4受体(PR)和细胞色素P450 19A1(CYP19A1)基因表达影响显著(P<0.05),各处理间FSH受体(FSHR)、LH受体(LHR)、E2受体(ER)、类固醇急性调节蛋白(StAR)、3β—羟基固醇脱氢酶(3β—HSD)和细胞色素P45011A1(CYP1141)基因表达无差异(P>0.05);处理时间对LHR、PRLR、PR、ER、StAR、3β—HSD、CYP11A1基因表达无影响(P>0.05),第11 dFSHR基因表达显著(P<0.05)高于第5d,与第8 d无显著差异(P>0.05);第11 d CYP19A1基因表达显著高于第8 d(P<0.05),与第5 d无显著差异(P>0.05);处理及时间交互作用对相关生殖基因表达无影响(P>0.05)。免疫组化结果表明FSHR和CYP19A1蛋白在小腔卵泡颗粒细胞和膜细胞的免疫反应高于中、大腔卵泡。综上所述,黄体末期单独使用FSH处理母羊促卵泡发育效果优于黄体前期和中期;P4+FSH处理母羊促卵泡发育效果优于P4、FSH单独处理;黄体末期,P4+FSH处理母羊上调了 FSHR和CYP19A1的mRNA表达,影响了卵泡的发育。
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