论文部分内容阅读
目的探讨原发性肝癌中B细胞异位基因2(B cell translocation gene 2,BTG2)的表达情况及其和肝癌术后生存之间的关系。研究BTG2基因的DNA甲基化和其表达的相关性,以及其DNA甲基化在原发性肝癌中的临床意义。方法1、收集我院经病理学确诊为肝细胞癌患者125例,利用免疫组化方法检测BTG2蛋白的表达情况,并分析其与肝癌的临床病理因素的相关性,以及其对肝癌术后总生存的预测作用。2、查阅TCGA数据库并进行生物信息学分析,选择合适的两个BTG2基因的CG位点(cg00567854和cg01798157)作为DNA甲基化检测的候选位点。3、从125例肝癌患者的组织中挑选出合适的组织,共51例患者的66例石蜡样本,其中15例患者有癌旁和癌的配对组织。然后用焦磷酸测序方法检测BTG2基因的DNA甲基化。并分析DNA甲基化与BTG2表达的相关性及其在肝癌中的临床意义。结果1、125例肝癌组织中,阴性组、低表达组和高表达组分别为106、13、6例。癌旁组织中,BTG2阴性组、低表达组和高表达组分别为41、14、22例,癌旁组织和癌组织的BTG2表达构成比具有显著差异(χ~2=28.102,P<0.001)。2、BTG2的表达和HCC癌栓的发生有显著相关性(χ~2=8.305,P=0.013)。3、Kaplan-Meier生存曲线分析表明,BTG2低表达组中位OS为36个月(95%CI:8.436-63.564),而阴性组和高表达组没有达到中位OS(Log-Rankχ~2=4.512,P=0.105)。亚组分析表明,BTG2高表达组患者OS显著长于低表达组(χ~2=4.266,P=0.039),阴性组与高表达组(χ~2=2.729,P=0.099)以及阴性组与低表达组(χ~2=1.400,P=0.237)间无统计学差异。但是对其他因素校正后的多因素回归分析表明BTG2蛋白表达没有进入回归方程。4、位于BTG2基因转录起始位置的cg00567854甲基化水平在癌与癌旁组织中没有差异(P=0.739),位于3’-UTR的cg01798157也没有差异(P=0.947);Kruskal-Wallis检验结果显示不同BTG2表达组间两个位点的DNA甲基化水平均无显著性差异(cg00567854,P=0.714;cg01798157 P=0.448)5、单因素及多因素Cox回归分析结果显示,cg01798157的甲基化是肝癌患者总生存的独立预后因素(P<0.001,HR=0.935)。以癌组织cg01798157位点甲基化水平64%作为分组界值,Kaplan-Meier生存分析结果显示cg01798157高甲基化组(大于64%)预后要显著好于低甲基化组(Log-Rankχ~2=8.316,P=0.004)。结论1、BTG2在肝细胞癌患者的癌组织中表达明显低于癌旁组织;2、肝细胞癌中BTG2表达与肝癌患者的癌栓形成有关;3、BTG2高表达的肝细胞癌患者可能有更好的预后,可以作为肝癌预后的潜在指标之一;4、BTG2基因3’-UTR端的cg01798157位点的甲基化能够作为肝癌的独立预后因子。