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本文分为以下几个部分进行探讨： 第一部分 盘状结构域受体1在卵巢癌组织中的表达及临床意义 目的：探讨人卵巢癌组织中盘状结构域受体1(DDR1)蛋白的表达情况及其临床意义。 方法：运用免疫组化法检测33例正常卵巢组织、43例卵巢良性肿瘤组织及94例卵巢癌组织中的DDR1蛋白表达情况，比较不同临床病理特征卵巢癌病人的DDR1蛋白阳性表达率，分析DDR1蛋白阳性表达与卵巢癌病人病理特征及预后的关系。 结果：卵巢癌组织的阳性表达率[55.32％(52/94)]均高于正常卵巢组织[0(0/33)]、卵巢良性肿瘤组织[11.63％(5/43)](均P＜0.05)，而正常卵巢组织与良性卵巢肿瘤组织的阳性表达率比较，差异无统计学意义(P＞0.05)。FIGOⅢ～Ⅳ期、低分化、有腹腔转移病人的DDR1蛋白的表达阳性率[60.98％(50/82)、62.16％(46/74)、66.67％(42/63)]分别高于FIGOⅠ～Ⅱ期、中-高分化者、无腹腔转移的病人的阳性表达率[16.67％(2/12)、30％(6/20)、32.26(10/31)]（均P＜0.05）。卵巢癌组织中DDR1蛋白的阳性表达及腹腔转移是卵巢癌患者死亡的危险因素(P＞0.05)。 结论：DDR1蛋白在卵巢癌组织中呈高表达，其可能参与了卵巢癌的发生发展与远处转移，或可成为评估患者预后的重要因素。 第二部分 外源性Collagen Ⅰ诱导下TM4SF1对高转移性卵巢癌细胞HO8910PM生物学行为影响的体外研究 目的：研究外源性Collagen Ⅰ诱导下TM4SF1对高转移性卵巢癌细胞H08910PM的体外生物学行为的影响。 方法：慢病毒转染RNAi抑制TM4SF1在HO8910PM的表达，RT-PCR以及Western Blot技术检测RNAi后细胞中TM4SF1基因蛋白的表达情况。细胞免疫荧光方法检测在有无外源性Collagen Ⅰ的存在下TM4SF1与DDR1在HO8910PM中的定位，Transwell迁移和侵袭实验检测细胞迁移与侵袭能力的改变。 结果：成功构建了靶向沉默TM4 SF1并同时表达GFP荧光的慢病毒载体，感染并筛选出稳定表达细胞株LV-TM4 SF 1-RNAi-GFP-HO8910PM以及阴性对照LV-CON-TM4 SF 1-GFP-HO8910PM。RT-PCR实验表明TM4 SF1基因在mRNA水平沉默效率约为65％，Western Blot检测TM4 SF1蛋白沉默效率约为70％。免疫荧光结果显示TM4 SF1及DDR1均为细胞膜蛋白，当有外源性Collagen Ⅰ存在时，TM4 SF1可使DDR1在细胞膜上聚集，同时伴随TM4SF1聚集。Transwell迁移实验表明:LV-RNAi-TM4SF 1-GFP-HO8910PM组细胞穿过Transwell小室的细胞数为94.667±9.018，较HO8910PM组(257.667±17.898)及LV-CON-TM4SF1-GFP-HO8910PM组(261.667±29.023)明显下降(P＜0.05);LV-RNAi-TM4SF1-GFP-HO8910PM在有50μg/ml Collagen Ⅰ存在的条件下，细胞穿过Transwell小室的细胞数为150.667±7.371，与HO8910PM+50μg/ml Collagen Ⅰ组(370.000±16.523)及LV-CON-TM4SF 1-GFP-HO8910PM+50μg/ml Collagen Ⅰ组(377.333±15.948)相比较明显下降（均P＜0.05）。当有外源性Collagen Ⅰ存在时，HO8910PM、LV-RNAi-TM4SF 1-GFP-HO8910PM、LV-CON-TM4SF 1-GFP-HO8910PM细胞穿过Transwell小室的细胞数均较无外源性Collagen 1存在时明显增加（均P＜0.05）。Transwell侵袭实验表明:LV-RNAi-TM4SF 1-GFP-HO8910PM组细胞穿过铺设Matrigel的Transwell小室的细胞数为57.00±5.568，较HO8910PM组(134.333±6.658)及LV-CON-TM4SF1-GFP-HO8910PM组(141.333±7.638)明显下降（均P＜0.05），LV-RNAi-TM4SF 1-GFP-HO8910PM在有外源性Collagen Ⅰ存在的条件下，细胞穿过铺设Matrigel的Transwell小室的细胞数为109.000±4.359，与HO8910PM+50μg/ml CollagenⅠ组(216.333±16.921)及LV-CON-TM4SF 1-GFP-HO8910PM+50μg/ml Collagen Ⅰ组(226.667±4.509)相比较明显下降（均P＜0.05）。当有外源性Collagen Ⅰ存在时，HO8910PM、LV-RNAi-TM4SF 1-GFP-HO8910PM、LV-CON-TM4SF 1-GFP-HO8910PM细胞穿过铺设Matrigel的Transwell小室的细胞数均较无外源性Collagen Ⅰ存在时明显增加（均P＜0.05）。 结论：TM4SF1与DDR1均为细胞膜蛋白，TM4SF1可以在外源性Collagen Ⅰ存在的条件下使DDR1在细胞膜上聚集，同时伴随TM4SF1聚集。下调TM4SF1的表达可以抑制卵巢癌HO8910PM细胞的迁移以及侵袭能力。外源性Collagen Ⅰ的存在可以促进卵巢癌HO8910PM细胞的迁移以及侵袭。 第三部分外源性CollagenⅠ诱导下DDR1对高转移性卵巢癌细胞HO8910PM生物学行为影响的体外研究 目的：研究外源性Collagen Ⅰ诱导下DDR1对高转移性卵巢癌细胞H08910PM的体外生物学行为的影响。 方法：慢病毒转染RNAi抑制DDR1在HO8910PM的表达，RT-PCR以及Western Blot检测干扰效率，Transwell迁移和侵袭实验检测细胞迁移与侵袭能力的改变。 结果：RT-PCR与Western结果显示，LV-DDR1-RNAi-mcherry-2沉默DDR1效果最佳，RT-PCR实验表明DDR1基因在mRNA水平沉默效率约为85％，Western Blot检测DDR1蛋白沉默效率约为95％。用其感染并筛选出稳定转染细胞株LV-DDR1-RNAi-mcherry-HO8910PM以及阴性对照LV-CON-DDR1-mcherry-HO8910PM。Transwell迁移实验表明:LV-RNAi-DDR1-mcherry-HO 8910PM组细胞穿过Transwell小室的细胞数为99.000±5.292，较HO8910PM组(160.333±6.028)及LV-CON-DDR1-mcherry-HO8910PM组(161.000±4.583)明显下降（均P＜0.05），LV-DDR1-RNAi-mcherry-HO8910PM在有50μg/ml Collagen Ⅰ存在的条件下，细胞穿过Transwell小室的细胞数为150.667±5.508，与HO8910PM+50μg/ml Collagen Ⅰ组(239.000±10.583)及LV-CON-DDR1-mcherry-HO8910PM+50μg/ml Collagen Ⅰ组(237.667±8.386)相比较明显下降（均P＜0.05）。Transwell侵袭实验结果显示:LV-RNAi-DDR1-mcherry-HO8910PM组细胞穿过铺设Matrigel的Transwell小室的细胞数为66.000±6.557，较HO8910PM组(126.667±6.506)及LV-CON-DDR1-mcherry-HO8910PM组(133.667±7.572)明显下降(均P＜0.05) LV-RNAi-DDR1-mcherry-HO8910PM在有50μg/ml Collagen Ⅰ存在的条件下，穿过铺设Matrigel的Transwell小室的细胞数为117.000±7.211，与HO8910PM+50μg/ml Collagen Ⅰ组(180.000±2.646)及LV-CON-DDR1-mcherry-HO8910PM+50μg/ml Collagen Ⅰ组(190.000±9.849)相比较明显下降（均P＜0.05）。当有外源性Collagen Ⅰ存在时，HO8910PM、LV-RNAi-DDR1-mcherry-HO8910PM、LV-CON-DDR 1-mcherry-HO8910PM细胞穿过铺设Matrigel的Transwell小室的细胞数均较无外源性Collagen Ⅰ存在时明显增加（均P＜0.05）。 结论：下调DDR1的表达可以抑制卵巢癌HO8910PM细胞的迁移以及侵袭能力。外源性Collagen Ⅰ的存在可以促进卵巢癌HO8910PM细胞的迁移以及侵袭。