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目的:通过观察局部亚低温对大鼠脑出血后神经功能缺失、血肿周围脑组织形态学变化以及血清中神经元特异性烯醇化酶(NSE)和s-100β蛋白浓度的影响,明确NSE和s-100β蛋白在早期诊断脑损伤、评估脑出血严重程度及预测预后的作用,探讨局部亚低温发挥脑保护作用的可能机制,为局部亚低温的临床应用提供理论依据。方法:(1)随机将60只健康雄性SD大鼠分成三组:局部亚低温组(20只)、常温组(20只)、假手术组(20只)。各组按不同的断头取脑时间点分为术后6h、1d、3d和7d总共4个亚组,每个亚组5只大鼠。(2)以“自体血注入法”建立大鼠脑出血模型。局部亚低温组和常温组以大鼠自体不抗凝血50μL注入右侧尾状核,假手术组不注血。(3)评价脑出血造模是否成功。(4)局部亚低温干预,将麻醉好的大鼠右侧头颅置于冰袋上,持续3h,期间维持大鼠鼓膜温度在32℃~33℃之间。局部亚低温6h组在确定造模成功后立即实施局部亚低温,1d组、3d组和7d组每天固定时间给予局部亚低温。常温组和假手术组仅给予等量药物麻醉,维持鼓膜温度在36°C~37°C。(5)按Garcia评分观察各组大鼠不同时间点神经功能缺失情况。(6)采集大鼠血清及脑组织标本,酶联免疫吸附法测定血清中NSE和s-100β蛋白浓度,脑组织HE染色,观察脑组织形态结构的改变。(7)全部资料用SPSS 17.0进行分析,数据采用“平均值±标准差”表示,P<0.05表示差异有意义。结果:(1)神经功能缺失评分(NDS):局部亚低温组和常温组在各时间点的神经功能缺失评分均低于假手术组,差异有统计学意义(P<0.05)。与同组内其他时间点相比,局部亚低温组和常温组均以3d组神经功能缺失评分最低,差异有统计学意义(P<0.05)。局部亚低温组在各时间点的神经功能缺失评分均高于相应的常温组,差异有统计学意义(P<0.05)。(2)脑组织形态结构的改变:假手术组脑组织中神经元及神经胶质细胞完整,胞核、胞浆染色均匀。常温组6h组、1d组血肿周围神经细胞水肿明显,可见大量红细胞,少量炎症细胞;3d组血肿周围的神经元明显水肿坏死,核固缩深染,红细胞减少,中性粒细胞浸润,偶见胶质细胞增生;7d组可见血肿周围神经细胞水肿较前减轻,中性粒细胞减少,大量胶质细胞增生。局部亚低温组的脑组织结构变化在6h组、1d组与常温组相似,3d组、7d组神经细胞肿胀坏死范围较常温组小,可见少量炎症细胞浸润及胶质细胞增生。(3)局部亚低温组和常温组在各时间点的血清NSE含量均高于假手术组,差异有统计学意义(P<0.05);与同组内其他时间点相比,局部亚低温组和常温组血清NSE含量均以3d组最高,差异有统计学意义(P<0.05);局部亚低温组在各时间点的NSE含量均低于常温组,差异有统计学意义(P<0.05)。(4)局部亚低温组和常温组在各时间点的血清s-100β蛋白浓度均高于假手术组,差异有统计学意义(P<0.05);与同组内其他时间点相比,局部亚低温组和常温组血清s-100β蛋白含量均以3d组最高,差异有统计学意义(P<0.05);局部亚低温组在各时间点的s-100β蛋白浓度均低于常温组,差异有统计学意义(P<0.05)。(5)大鼠脑出血后血清中NSE浓度与NDS呈负相关,差异有统计学意义(r=-0.765,P=0.000);血清中的s-100β蛋白浓度与NDS呈负相关,差异有统计学意义(r=-0.680,P=0.001);s-100β蛋白浓度变化与血清NSE浓度变化呈正相关,差异有统计学意义(r=0.951,P=0.000)。结论:(1)自体不抗凝血制作SD大鼠尾状核脑出血模型定位准确,成功率高,重复性好。(2)脑出血后血清NSE和s-100β蛋白含量与神经功能呈负相关,二者存在联系,能够综合评价脑出血后脑损伤的严重程度。(3)局部亚低温可降低脑出血后血清NSE和s-100β蛋白含量,从而发挥脑保护作用。