中药是中华民族的传统瑰宝,是有独特优势并能形成我国自主知识产权成果的研究领域。其中酮类成分,如黄酮、呋喃酮类,是中药中一类主要的活性成分,尤其是黄酮类成分,在中药中分布广、种类多,具有多种药理作用的活性成分。色谱技术作为现代分析技术的重要组成部分,是中药成分定性、定量分析不可或缺的有效手段,但由于中药的成分组成复杂、不稳定,不同成分的含量差异大,分析存在诸多的挑战。因此,开展高灵敏度、高效率的联用色谱分析方法研究,应用于中药活性成分的分析,具有深远的意义及广阔的应用前景。本工作在成分活性评价基础上,高效分离药材桑黄中2种单体作为指标成分,采用高速逆流色谱技术分离桑黄中的单体成分,进一步采用超高压液相色谱-三重四级杆质谱联用技术,建立了桑黄的含量测定方法；设计功能化的移液枪头,采用功能化枪头固相萃取-高效液相色谱联用技术,建立多种生物样本中4种淫羊藿黄酮苷的定量分析方法,研究内容包括以下六章。第一章：综述了黄酮类成分的药效活性及在中药中的分布情况,分析方法。从生物活性角度总结含黄酮类成分中药的药用价值；从分析方法、样品前处理及体内药物分析三个方面系统介绍了色谱法在含黄酮类中药分析中的应用。第二章：化学法评价中药桑黄的体外抗氧化活性,结果表明：桑黄具有羟自由基清除能力、超氧自由基阴离子清除能力及还原能力等抗氧化作用,经超高压液相-高分辨质谱鉴定了桑黄醇提液中包括呋喃酮类成分Inoscavin A和多酚类成分Hypholomine B等20种成分,且其中Hypholomine B为大鼠口服后入血成分。采用整体动物实验,评价中药淫羊藿对慢性骨髓炎动物的治疗作用,结果表明：由4种黄酮苷组成的淫羊藿总黄酮,以每天242.70 mg kg-1的剂量灌胃给药,治疗8周后,治疗组兔的骨愈合明显改善,与模型组与万古霉素治疗组相比,具有显著性差异。因此,有必要建立上述成分的体内、外含量测定方法。第三章：由于桑黄中的指标成分尚无商品化标准物质,因而首先建立高速逆流色谱法,高效分离桑黄中Inoscavin A和Hypholomine B等单体,经结构表征和纯度检测后,作为含量测定的标准品；进一步建立了超高压液相色谱-光电二极管阵列-三重四级杆质谱联用法,快速同时测定桑黄药材中2种成分的含量,建立的方法成功应用于桑黄不同产地实际样品的检测。与传统的高效液相色谱法相比,该方法的检测时间从50 min缩短至10 min内。本方法Inoscavin A和Hypholomine B的定量限分别是0.39 mg L-1和0.28 mg L-1,InoscavinA和Hypholomine B的回收率分别在103.8～105.3%和104.4～105.0%范围内,RSD值均小于3%。第四章：针对淫羊藿中4种黄酮苷成分体内药物浓度较低,样品前处理技术要求高的现实问题,设计了具备固相萃取功能的移液枪头,通过固相萃取填料的比较,选择能够高效吸附目标成分、有效除杂的C18填料,制备了填充固相萃取填料的功能化移液枪头。进而对含药血清进行固相萃取条件考察,优化血清固相萃取流程,确定100μL为血清取样量,静置吸附时间1 min,以500μL水洗除杂,100μL乙腈静置5 min后洗脱,作为供试品溶液的最佳条件,吸取20μL进行液相分析。与传统的蛋白沉淀、溶剂萃取和市售固相萃取小柱预处理方法比较,该方法具有简化操作步骤、减少转移浓缩及复溶过程中的误差、提高富集效率等优点,能够有效富集生物样本中的微量黄酮苷。同时该枪头可以通过更换吸附填料,优化萃取流程,推广应用于其他多种中药活性成分的生物样本预处理。第五章：采用功能化枪头固相萃取-高效液相色谱法,建立了同时测定血清中4种黄酮苷含量的方法。结果表明4种淫羊藿黄酮苷与血清中的其他成分能很好分离；朝藿定A、B、C和淫羊藿苷均在0.05～10.00 mg·L-1内呈现良好线性关系,平均回收率分别为98.82%、97.12%、97.43%和96.59%,检测限分别为0.042、0.045、0.040和0.023 mg·L-1。利用建立的方法,明确了4种黄酮苷在慢性骨髓炎兔体内的药物浓度变化,以及在大鼠体内的药动学参数。该方法具有灵敏度高、操作简便等优点,可以用于中药药代动力学研究及体内药物浓度监测。第六章：对色谱及色谱联用方法在中药研究的应用进行了总结和展望,设计便捷高效的生物样品预处理方法,开发灵敏度高、准确、快速的分析方法,十分必要,在中药研究领域的应用前景广阔。