凋亡相关蛋白TFAR19单克隆抗体的制备及其在细胞凋亡过程中的核转位研究

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随着现代分子生物学技术的快速发展,目前人们已发现了众多与细胞凋亡调控有关的基因及其表达产物,它们在细胞凋亡的不同时期发挥着重要的作用.TFAR19是由该研究室利用cDNA-RDA(cDNArepresentationaldifferencesanalysis)技术,在研究去细胞因子诱导凋亡的人红白血病细胞株TF-1细胞差异表达的基因过程中,克隆出的一个拥有自己知识产权的人类新基因,命名为TFAR19.为深入探讨TFAR19的生物学效应,在上述研究工作的基础上,作者利用重组人TFAR19为抗原,采用传统的淋巴细胞杂交瘤技术,研制出了鼠抗人TFAR19蛋白的单克隆抗体并进行了特异性鉴定.将单抗进行FFTC标记,以此为探针,辅以绿色荧光蛋白标记技术,作者进一步研究了不同方式诱导的细胞凋亡过程中TFAR19蛋白的表达水平及其细胞定位.分析了凋亡早期TFAR19的核转位与其它凋亡指标的关系,包括PS外翻、DNA片段化、染色质结构紊乱与浓缩、以及线粒体跨膜电位的下降等.对其与caspase蛋白水解酶的活性、细胞周期的关系也进行了初步探讨.作者的研究为阐明TFAR19分子功能的多样性提供了新的证据,并且提出了TFAR19的核转位是一种新的检测早期凋亡的指标,这对监控细胞凋亡整个过程中所发生的事件及其进行系统性地研究可能具有重要的理论意义和实用价值.
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