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为构建高效促动物生长基因，探索研制新型促动物生长制剂。本实验室应用重叠区基因拼接法(Gene Splice by Overlap Extension，GSOE)对胰岛素样生长因子-1基因加以改造。在其N端引入BamHI的酶切位点，C端引入BglⅡ和EcoRI酶切位点以及终止密码子，并在酶切位点之前添加保护性碱基。去除了N端四个末端氨基酸(Gly-Pro-Glu-Thr) 以及中间 C区Gly-Set-Ser-Ser-Arg-Arg-Ala部分序列，保留其活性部位。克隆PCR产物于pMD18一T载体上测序，测序结果显示，PCR产物大小为205bp，编码59个氨基酸，与目的片段大小一致。将测序正确的PCR产物构建了pGEX-4T-1-IGF-1D原核表达载体。经BamHI和EcoRI酶切及质粒PCR鉴定，证实本实验构建的新型胰岛素样生长因子基因-1已克隆到原核表达载体pGEX-4T-1上，为进一步研究其诱导表达条件及生物学功能奠定了基础。
将已构建的pGEX-4T-1-IGF-1D蛋白表达载体质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)，用2×YTA培养基培养，以IPTG诱导融合蛋白表达，作SDS-PAGE分析表达情况。结果显示，表达蛋白分子量约为33kDa，与预期目标带大小一致。将诱导条件经过温度梯度、时间梯度以及IPTG浓度梯度的分析选择进行优化。通过优化原核诱导表达条件，发现pGEX-4T-1-IGF-1D蛋白在37℃，IPTG终浓度为0.5mM的条件下诱导4小时，蛋白表达效果较佳。
将菌体反复冻融后超声破碎，将破碎后的上清及沉淀分别作SDS-PAGE分析，发现融合蛋白的表达产物以包涵体形式存在。将融合蛋白用GlutathioneSepharose 4B纯化后，初步分离得到目的蛋白。用MTT法通过猪淋巴母细胞刺激增殖能力来检测IGF-1D活性，显示IGF-1D具有良好的促进动物细胞生长的生物学活性，为深入开展新型IGF-1的动物体内活性研究奠定了基础。