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目的:阐明巨噬细胞中敲除HIF-2α对肾脏缺血再灌注的影响及分子机制。方法:将Lyz-Cre+HIF-2αloxp/loxp和Lyz-Cre-HIF-2αloxp/loxp小鼠随机分为假手术组和实验组,并构建小鼠肾脏缺血再灌注模型。于再灌注后24h处死小鼠,检测血清中Cr和BUN含量。检测血清和肾脏中炎症因子TNF-α、IFN-γ、IL-1β、IL-6及IL-10的表达水平。肾脏HE染色观察肾脏组织形态学改变。观察记录小鼠48h生存率。提取小鼠骨髓细胞并诱导分化为成熟的巨噬细胞,分为A组:HIF-2α+/+、LPS 100ng/ml、21%O2 24h;B组:HIF-2α-/-、LPS 100ng/ml、21%O2 24h;C组:HIF-2α+/+、LPS 100ng/ml、15μM PFT-α、21%O2 24h;D组:HIF-2α-/-、LPS 100ng/ml、15μM PFT-α、21%O2 24h;E组:HIF-2α+/+、LPS 100ng/ml、1%O2 24h;F组:HIF-2α-/-、LPS 100ng/ml、1%O2 24h;G组:HIF-2α+/+、LPS 100ng/ml、15μM PFT-α、1%O2 24h;H组:HIF-2α-/-、LPS 100ng/ml、15μM PFT-α、1%O2 24h。ELISA检测细胞培养上清中炎症因子TNF-α、IFN-γ、IL-1β、IL-6及IL-10的水平。FACS检测各组巨噬细胞的凋亡情况。Western blot检测各组巨噬细胞中HIF-2α、P53、Phospho-p53(Ser15)、Puma、Bax及cleaved caspase-3的表达水平。结果:与Lyz-HIF-2α+/+小鼠相比,Lyz-HIF-2α-/-小鼠肾脏IR后,血清Cr、BUN水平和肾组织中TNF-α及IFN-γ水平降低而IL-10水平升高,肾脏组织结构损伤减轻,48h生存率增加。进一步研究发现,从Lyz-HIF-2α-/-小鼠提取的原代骨髓来源巨噬细胞在低氧环境下的凋亡率及细胞中P53、Phospho-p53(Ser15)、Puma、Bax、cleaved caspase-3蛋白表达量较Lyz-HIF-2α+/+小鼠明显增加,且上述增加可被PFT-α(P53抑制剂)消除;同时细胞培养上清中TNF-α、IL-6水平下降而IL-10水平升高,但不受PFT-α的影响。结论:巨噬细胞中特异性敲除HIF-2α可减少巨噬细胞促炎因子分泌且增加抑炎因子分泌,并通过促进P53通路的激活增加巨噬细胞的凋亡,从而减轻肾脏缺血再灌注损伤。