应用流式细胞术快速检测儿童浆膜腔积液中肿瘤细胞

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背景和目的:人体的浆膜腔如胸腔、腹腔、心包腔等在正常情况下仅有少量液体。在病理情况下则可能有多量液体贮留而形成浆膜腔液。这些积液随部位不同而分为胸腔积液、腹腔积液、心包腔积液、脑脊液等。积液可以是患者的首发症状或在疾病的进展过程中形成。用浆膜腔积液常规检查项目为标准只能鉴别出渗出液或漏出液,易被临床表现疾病所误导,目前浆膜腔常规检查的模式已不能满足临床检验及疾病诊断的需要。因此,临床迫切要求通过积液其他检查手段提供良性或恶性疾患的确切信息。本研究通过流式细胞术对103例儿童积液细胞进行免疫表型分析,并与回顾性的临床结果(RCO)比较,探讨流式细胞术对儿童积液肿瘤细胞的诊断价值。方法:进入分析的积液共有103例分别来自103为病人,于浙江大学医学院医学院附属儿童医院就诊及住院治疗,诊断与治疗日期在2005年2月至2011年9月之间,年龄在1岁6月至13岁5月之间,中位年龄7.3岁。其中男性59例,女性44例,男:女=1.3:1。其中胸腔积液穿刺标本68人次、腹腔积液穿刺标本32人次、脑脊液穿刺标本3人次。采用积液细胞形态学检查及直接免疫荧光染色用多色流式细胞术检测细胞表面及胞浆抗原,并将流式细胞仪诊断结果与临床诊断进行比较。结果:通过中位值为15.2个月的临床随访,根据RCO诊断标准,41例最终诊断为肿瘤性,62例为非肿瘤性。积液细胞形态学诊断结果:78例(75.7%)为阴性,6例(5.8%)可疑,19例(20.6%)为阳性。形态学检查的敏感性和特异性分别为61.0%和96.9%。肿瘤组41例经流式细胞术检查,36例(87.8%)诊断为肿瘤,其中包括25例淋巴瘤(NHL)、2例急性髓细胞性白血病(AML)、8例神经母细胞瘤和1例视网膜母细胞瘤,肿瘤细胞占所有细胞中的比例为0.7%-97.2%(中位值:66.4%)。肿瘤组5例流式细胞检测结果阴性的病例分别为2例何杰金淋巴瘤(HD)、1例间变性大细胞淋巴瘤和2例软组织肉瘤。在所有病例中,流式细胞术诊断检测肿瘤细胞的的敏感性和特异性分别为87.8%和98.4%,与最终诊断的符合率为94.2%。对于淋巴瘤病例,流式细胞术与最终诊断的符合率为89.6%(25/28),当排除HD时,总的符合率达到96.1%。以CD8I+/CD56强+/CD45-表型为神经母细胞瘤特征性标记,用流式细胞术共检出8例积液有神经母细胞瘤细胞存在,与临床最终诊断的符合率为100%。结论:流式细胞术可以快速、可靠地检测儿科病人浆膜腔积液中的淋巴瘤细胞,并可进行淋巴瘤的分型,同时可以检测一些非淋巴系的肿瘤,尤其是神经母细胞瘤,对指导患者临床治疗有重要的应用价值。
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