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目的：皮瓣缺血再灌注损伤是游离皮瓣移植不可避免的并发症,也是术后组织血运障碍、水肿以及坏死等并发症发生的主要原因。目前研究认为皮瓣缺血再灌注损伤与组织内活性氧物质爆发而导致的广泛的氧化应激损伤和细胞凋亡密切相关。硫氧还蛋白(Thioredoxin, Trx)是广泛分布于机体各组织细胞中的生命基础蛋白,对细胞内氧化还原平衡的维持和细胞凋亡分子通路的调控具有重要意义。我们的前期研究发现trxl基因与皮肤组织对缺氧的耐受能力有关。因此,本研究通过临床组织标本检测、体外细胞实验和动物体内实验探讨和研究Trx-1对皮瓣缺血再灌注损伤的保护作用、分子机制、预后意义和治疗价值。方法：1、对10名接受游离皮瓣移植手术的患者采取缺血再灌注皮瓣组织标本,以自身正常全层皮肤组织作对照,分别应用TUNEL染色和免疫组织化学染色检测临床组织标本中细胞凋亡程度和Trx-1表达量,并通过线性回归分析二者之间的相关关系。2、构建CoCl2诱导的角质形成细胞(HaCAT)化学缺氧模型,应用Wenstern blot检测和分析缺氧环境下细胞凋亡相关蛋白的表达情况和重组人Trx-1蛋白对缺氧细胞的保护作用机制。3、构建小鼠缺血再灌注皮瓣模型,观察再灌注7日内皮瓣存活率的差异,并应用HE染色、免疫组织化学染色、(?)UNEL染色、SOD活力测定、MDA含量测定以及Wenstern blot研究体内环境中Trx-1对缺血再灌注皮瓣的保护作用、分子机制和预后意义,以及重组人Trx-1蛋白对皮瓣缺血再灌注损伤的治疗价值。结果：1、临床缺血再灌注皮瓣组织标本内细胞凋亡程度明显升高(p<0.01),同时Trx-1表达量明显降低(p<0.01),并且二者呈现高度线性负相关(r2=0.89,p<0.01)。2、缺氧环境能够导致HaCAT细胞内Trx-1表达量明显降低(p<0.01),并上调ASK-MAPK凋亡信号通路蛋白ASK1、p-p38以及凋亡标志蛋白c-PARP的表达(p<0.01)。3、应用重组人Trx-1蛋白预防性孵育HaCAT细胞能够提高细胞内Trx-1表达水平(p<0.01),并显著降低凋亡相关蛋白HIF-1α、p-p38和c-PARP的表达(p<0.05)。4、在没有药物干预的情况下,小鼠缺血再灌注皮瓣内细胞凋亡程度明显升高(p<0.01),同时Trx-1表达量明显降低(p<0.01),并且二者呈现高度线性负相关(r2=0.93,p<0.01)。5、预防性全身应用重组人Trx-1蛋白能够减轻皮瓣缺血再灌注相关的病理损伤,显著提高小鼠缺血再灌注皮瓣的存活率(p<0.01)。6、小鼠缺血再灌注皮瓣中SOD活力显著下降,而MDA含量显著升高,与假手术组比较差异具有统计学意义(p<0.01)；重组人Trx-1蛋白给药后,皮瓣内SOD活力明显升高,MDA含量明显下降,与非给药组之间的差异具有统计学意义(p<0.05)。7、小鼠缺血再灌注皮瓣组织内的Trx-1表达量显著下降(p<0.01),同时ASK-MAPK凋亡信号通路蛋白ASK1、p-p38以及凋亡标志蛋白cl-caspase 3的表达量显著升高(p<0.01)；预防性全身应用重组人Trx-1蛋白能够提高皮瓣组织内Trx-1的含量(p<0.01),并且下调ASK-MAPK细胞凋亡通路相关蛋白ASK1、p38的磷酸化水平和凋亡关键酶caspase 3的剪切激活(p<0.01)。结论：1、Trx-1对缺血再灌注皮瓣和缺氧角质形成细胞具有重要的保护作用。2、Trx-1的保护作用是通过直接清除活性氧物质的抗氧化机制和抑制ASK-MAPK分子信号通路的抗凋亡机制实现的。3、游离皮瓣内Trx-1含量可能是影响缺血再灌注损伤后皮瓣存活的重要预后因素。4、Trx-1作为药物干预靶点对皮瓣缺血再灌注损伤具有重要的治疗价值和良好的临床应用前景。