GNPs、CSP-GNPs的制备及其对人宫颈癌SiHa细胞毒性的初步研究

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【目的】本实验通过制备金纳米颗粒(gold nanoparticles GNPs),并在其表面修饰宫颈癌特异性结合肽(cervical cancer specific binding peptide,CSP),合成对人宫颈癌具有靶向性的金纳米颗粒复合物CSP-GNPs,研究不同浓度GNPs、CSP-GNPs对人宫颈癌SiHa细胞存活率的影响,初步探讨其对SiHa细胞的毒性,为后续进行宫颈癌靶向放射增敏实验研究提供参考依据。【方法】(1)柠檬酸三钠还原法制备GNPs,并在室温下将末端带有半胱氨酸的CSP与GNPs以Au-S键偶联,合成CSP-GNPs复合物;并通过调节反应体系pH值、多肽溶液/金纳米颗粒溶液体积比及反应时搅拌转速,研究其对CSP-GNPs分散性及稳定性的影响;采用马尔文粒度仪、透射电子显微镜(TEM)、扫描电子显微镜(SEM)、紫外可见分光光度计(UV-Vis)等对金纳米材料进行测试与表征,电感耦合等离子发射光谱仪(ICP-AES)检测金纳米颗粒溶液中金元素浓度,傅里叶红外光谱仪、X射线光电子能谱仪(XPS)验证GNPs与CSP连接成功与否。(2)取对数生长期的人宫颈癌SiHa细胞,以含有不同浓度的GNPs、CSP-GNPs的无血清的培养液培养24h、48h后,用台盼蓝染色法检测GNPs、CSP-GNPs对SiHa的毒性作用。【结果】(1)成功制备出平均粒径大小约16.7nm的GNPs,ICP-AES测定制备的GNPs溶液中金浓度为66.3mg/L。(2)制备出分散性、稳定性均较好的CSP-GNPs复合物。(3)不同浓度的GNPs及CSP-GNPs对SiHa细胞增殖无明显抑制作用(P>0.05)。【结论】(1)柠檬酸三钠还原法制备的GNPs稳定性、分散性好,粒径大小易调控。(2)成功合成稳定性及分散性好的CSP-GNPs复合物。(3)浓度小于0.336mmol/L的GNPs、CSPGNPs对人宫颈癌SiHa细胞无明显细胞毒性。
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