【摘 要】
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大部分转基因植物是通过含有花椰菜花叶病毒(CaMV)35S启动子(P-35S)和35S终止子(T-35S)或农杆菌胭脂碱(Agrobacteriumtumefaciens nopaline)合成酶终止子(T-NOS)的载体所转化
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大部分转基因植物是通过含有花椰菜花叶病毒(CaMV)35S启动子(P-35S)和35S终止子(T-35S)或农杆菌胭脂碱(Agrobacteriumtumefaciens nopaline)合成酶终止子(T-NOS)的载体所转化的。最常见的克隆载体是pBR322质粒及其衍生物(例如pUC19),其中含有氨苄青霉素(bla)或卡那霉素(nptⅡ)抗性基因以用于筛选。所以,通过P-35S、T-35S、T-NOS、bla或nptⅡ这四种标志物来筛查遗传修饰材料的方法已得到广泛应用。本研究选择P-35S(以下简称35S基因)和T-NOS(以下简称NOS基因)两个基因为目标标志物来研究多重荧光PCR检测转基因生物。根据这两个基因的序列合成两对引物和用不同荧光染料标记的对应荧光双链探针,并结合PCR技术在同一反应体系内同时检测这两种靶基因,通过对标准质粒、转基因大豆样品的NOS基因和35S基因的同时检测,表明该方法在一次PCR反应中能同时检测出两种基因组分,证明了用这种多重荧光PCR同时检测多基因方法的可行性。
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