论文部分内容阅读
目的：研究组蛋白去乙酰酶抑制剂(HDACI)MGCD0103和吉西他滨(gemcitabine)及两者联合对体外培养的人骨肉瘤细胞株MG-63生长情况的影响,并探讨其可能的作用机制。方法：体外传代培养人骨肉瘤MG-63细胞,实验时取对数生长期的细胞。将不同浓度的MGCD0103(0.01,0.1、1、10、100umol/L)和(或)吉西他滨(0.025,0.05,0.1,0.2,0.4mg/L)分别作用于MG-63细胞,用单核细胞直接细胞毒性测定(MTT)法检测其对MG-63细胞的生长抑制作用及观察其有效作用浓度。培养人骨肉瘤细胞株MG-63在对数生长期加入不同浓度梯度的MGCD0103和吉西他滨进行干预,分别采用相差显微镜、荧光显微镜观察和检测细胞的凋亡情况。实时定量PCR检测处理后MG-63细胞HDAC3mRNA,MTAlmRNA表达的变化,western-blotting检测Bax,P21,VEGF表达水平的改变。结果:MGCD0103和(或)吉西他滨及两者联合能明显抑制MG-63细胞生长(p<0.05),呈时间和剂量依赖,MGCD0103和吉西他滨两者联合对MG-63细胞的抑制为协同作用(++)。MGCD0103(或)吉西他滨作用于MG-63细胞后,大量具有凋亡形态特征的细胞出现,凋亡比例明显增高,组蛋白的乙酰化水平显著提高,MTA1,VEGF,HDAC3mRNA及Bax,P21的表达被分别上调或下调。结论：MGCD0103通过诱导细胞凋亡及抑制细胞增殖而发挥体外的抗骨肉瘤作用,其作用机制涉及组蛋白乙酰化水平以及细胞周期和凋亡相关基因表达的调控。MGCD0103和吉西他滨联合使用确能使肿瘤抑制效应明显增强,有望成为治疗骨肉瘤的一种新的治疗手段。