【摘 要】
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S-腺苷甲硫氨酸（S-adenosyl-L-methionine, SAM）是广泛存在于各种生物体内的一种生理活性物质,在体内起着转甲基、转硫基、转氨丙基的作用,具有重要的药用和保健价值。在生物体内,S-腺苷甲硫氨酸（SAM）是由SAM合成酶催化甲硫氨酸与ATP生物合成的。本论文通过PCR技术,从酿酒酵母TCCC 31012扩增目的基因sam2,构建表达载体pACT2-sam2,以醋酸锂转化法转化
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S-腺苷甲硫氨酸（S-adenosyl-L-methionine, SAM）是广泛存在于各种生物体内的一种生理活性物质,在体内起着转甲基、转硫基、转氨丙基的作用,具有重要的药用和保健价值。在生物体内,S-腺苷甲硫氨酸（SAM）是由SAM合成酶催化甲硫氨酸与ATP生物合成的。本论文通过PCR技术,从酿酒酵母TCCC 31012扩增目的基因sam2,构建表达载体pACT2-sam2,以醋酸锂转化法转化酿酒酵母YS58,构建组成型表达S-腺苷蛋氨酸合成酶-2（SAMS2）的酿酒酵母（S.cerevisiae）工程菌株。通过SDS-PAGE电泳对酿酒酵母阳性转化子胞内的蛋白进行分析,表达蛋白的分子质量（43kDa）与文献报道的酿酒酵母SAMS2的相对分子质量大小相符,因此,认为酿酒酵母SAM合成酶2基因（sam2）在酿酒酵母YS58中得到了表达。筛选了一株高效表达目的蛋白的工程菌株YS58-5。对工程菌株YS58-5的发酵培养基及培养条件进行了优化、确定了培养的初始pH、培养温度、装液量、接种量等工艺参数。优化条件：碳源以葡萄糖最好,氮源选择了（NH4）2SO4,同时发现随着细胞生长,细胞内同时表达外源SAMS2,累积SAM。并确定发酵培养基组分为（g／L）：酵母提取物8、葡萄糖50、（NH4）2SO45、K2HPO44、KH2PO42、MnSO40.01、MgSO4·7H2O 0.2、ZnCl20.01、L-甲硫氨酸5、硫酸腺嘌呤0.04。初始pH值5.0、培养温度30℃、装液量10%、接种量7%的摇瓶发酵条件。采用优化条件,重组工程菌株YS58-5发酵3d的SAM产量为3.02g／L发酵液。
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STEM教育强调科学、技术、工程、数学跨学科整合性,立足于具体的问题情境,以培养核心素养为目标,日益受到国内外的重视。幼儿园科学领域活动设计与实施缺乏整合性。本研究在梳理STEM教育内涵、本研究理论基础、幼儿园科学领域活动价值取向等相关理论的基础上开展了STEM教育理念下幼儿园大班科学领域活动实施行动研究,运用文献法、观察法、访谈法、行动研究法,研究者同时为实施者,在所在的D园M班,以M班幼儿为研
羽藻是一种在世界范围内有分布的,并且拥有独特生物学特点的海洋绿藻。从羽藻中挤出的原生质体可以在海水中团聚并重新长出新的藻株。在这个过程中细胞壁会从这些原生质体表面重新形成。我们通过扫描电镜及荧光显微镜对藓羽藻原生质的团聚过程进行了观察,发现细胞骨架参与调控了整个团聚过程,并扮演着十分重要的角色。同时我们也探索了藓羽藻细胞壁蛋白的提取方法,通过western blot检测证明我们提取出的细胞壁蛋白完
本论文利用毕赤酵母高拷贝质粒和大肠-枯草芽孢杆菌穿梭质粒,将外源基因蚓激酶F238分别克隆至毕赤酵母和枯草芽孢杆菌中进行表达,并对工程菌的培养条件进行了优化。主要研究结果如下：应用PCR技术扩增获得蚓激酶F238成熟肽基因,分别将其克隆至毕赤酵母和枯草芽孢杆菌表达载体pPIC3.5K和pPBE2R中,构建了两个表达载体：pPIC3.5K-F238、pPBE2R-F238。毕赤酵母GS115表达蚓激
Plectasin是2005年Mygind等从生长在北欧松树林的腐生子囊菌（the saprophytic ascomycete Pseudoplectania nigrella）中分离出来的首例真菌防御素类抗菌肽。Plectasin对革兰氏阳性菌有明显的抗菌活性,尤其是肺炎链球菌和金黄色葡萄球菌,其中还包括一些对常规抗生素有抗性的菌株。Plectasin在体外的杀菌速度相当快,与万古霉素和青霉素
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本研究根据超抗原和细胞因子的各自特性,构建成新型融合蛋白质即细胞生长因子-超抗原融合蛋白质,并研究了其在大肠杆菌BL21（DE3）中的表达以及真核表达。（1）根据Genebank报道的VEGF （NM-003376）、SEA（A28664）基因序列,对密码子进行优化,由TaKaRa公司合成含BamHⅠ、Hind酶切位点的VEGF-pMD18-T simple和含XhoⅠ、HindⅢ酶切位点的SEA
近年来,人们已经成功建立起酵母细胞的凋亡调节机制。尽管紫外线UV-B已经被广泛运用为研究人类细胞和植物细胞的凋亡的“刺激物”,但是运用于酵母细胞的研究甚少。为了研究酵母细胞在紫外线UV-B压力下的应对机制,将活化后的酵母细胞暴露在24 J／cm2、312 nm紫外灯下伤害培养大约96h,进行观察研究。本文首先通过观察紫外线对酵母细胞的致死率、酵母细胞形态,核酸含量和总蛋白等方面的影响,确证了其对酵
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