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急性淋巴细胞白血病（acute lymphoblastic leukemia,ALL）是最常见的儿童恶性肿瘤，ALL可以分为T系与B系，以B系为主，但T系急性淋巴细胞白血病(T-ALL)其危险程度要高于B系。许多因素促进了这一疾病的发生，包括基因的异常表达，环境因素，物质代谢和转运异常也起到一定作用，细胞膜上的转运蛋白的高表达也是儿童ALL的发病原因。 本项目组前期通过illumina中华芯片结果发现SLC7A7基因遗传变异与儿童ALL发生具有显著的关联性，且该基因编码蛋白y+LAT1参与形成阳离子氨基酸运输系统y+L(system y+L)。该转运系统从细胞中转运阳离子氨基酸到细胞外，如精氨酸等。已有文献表明SLC7A7异常表达与多种疾病预后相关，并且精氨酸对淋巴细胞的生物学特性发挥重要的调节作用。因此，推测SLC7A7基因具有调控ALL细胞增殖，凋亡及迁徙等生物学特性的作用，并通过上述作用，参与儿童ALL的发生发展；SLC7A7对ALL细胞的调控作用可能与其对精氨酸的转运有关。 本论文研究的主要内容：1.生物样本实验，探索SLC7A7在T系儿童急性淋巴细胞白血病初发患儿和对照儿童骨髓中表达。首先，利用Trizol法提取样本中总RNA，利用Real-time PCR分析SLC7A7mRNA在T-ALL患儿以及对照儿童骨髓中表达量；2.体外实验，使用T-ALL细胞株Jurkat细胞构建SLC7A7基因过表达以及沉默模型，SLC7A7过表达或者沉默后，在细胞水平上利用CCK-8检测细胞在其增殖能力的改变，流式细胞仪分析凋亡和周期，利用Transwell小室分析迁移与侵袭能力的变化。另外用人精氨酸ELISA试剂盒检测细胞转染后细胞培养上清中精氨酸含量是否改变。总之，以上结果表明SLC7A7能够影响Jurkat细胞的生物学特性，可能在急性淋巴细胞白血病的发病过程中起着重要作用。 目的： 研究主要是为了探索SLC7A7基因在儿童急性淋巴细胞白血病患儿以及对照儿童骨髓中表达差异，初步探究SLC7A7基因对急淋细胞Jurkat的生物学特性影响。 方法： 本实验用Real-time PCR分析SLC7A7mRNA在T-ALL患儿以及对照儿童骨髓中表达量，并通过构建SLC7A7过表达和沉默病毒载体感染Jurkat细胞，分析了细胞增殖、凋亡、周期、迁移侵袭能力的改变，以探讨SLC7A7在T细胞急性淋巴细胞白血病细胞中的作用，用人精氨酸ELISA试剂盒检测细胞转染后细胞培养上清中精氨酸含量是否改变。 结果： 在研究中，与对照组患儿骨髓相比，在T-ALL患儿骨髓中，SLC7A7mRNA表达增高。Jurkat细胞分别感染过表达和沉默SLC7A7病毒载体后，细胞增殖能力没有观察到明显变化。而在过表达SLC7A7后，Jurkat细胞凋亡率比明显降低(P=0.007)，而G1期细胞的比例(P=0.029)增加，同时细胞迁移(P小于0.001)和侵袭(P小于0.001)的能力在SLC7A7过度表达的细胞中明显增加。在沉默SLC7A7后，细胞凋亡比率增加(P=0.006)，G1期细胞比例(P=0.002)减少，迁移(P小于0.001)和侵袭(P小于0.001)能力均降低，转染了沉默SLC7A7病毒的细胞上清中精氨酸含量降低(P=0.035),转染SLC7A7过表达病毒的细胞培养上清中精氨酸含量增加(P=0.039)。 结论： 结果表明，SLC7A7基因影响Jurkat细胞的生物学特性，在T细胞急性淋巴细胞白血病的发病机制中具有重要作用。