目的 （1）通过体外药敏实验，研究化疗药物的对胰腺癌细胞的敏感性，（2）筛选敏感的化疗药物，指导临床化疗方案的确定，并讨论胰腺癌化疗个体化方案的意义：（3）探讨P53基因突变与胰腺癌化疗敏感性的关系：（4）研究维甲酸、三苯氧胺、吲哚美辛、异搏定和奥曲肽对胰腺癌化疗有增敏作用；（5）探讨维甲酸、三苯氧胺。吲哚美辛、异搏定和奥曲肽对胰腺癌化疗增敏作用的机理。 方 法 （1）用MTT法检测40例原代培养的胰腺癌细胞对甲氨蝶呤、5-尿嘧啶、丝裂霉素、长春地辛、羟基喜树碱、依托泊甙、顺铂、表阿霉素、吡柔比星和健择等十种药物的敏感性：（2）检测化疗药和小剂量的维甲酸、三苯氧胺、吲哚美辛、异搏定、奥曲肽联合后对原代培养的胰腺癌细胞生长抑制率：（3）用免疫组化ABC法检测相同40例胰腺癌组织P53蛋白表达，并分析其与药敏的关系；（4）检测不同浓度维甲酸、三苯氧胺、吲哚美辛、异搏定和奥曲肽对胰腺癌细胞株PANC-1生长的抑制率：（5）测定单独使用和加用小剂量维甲酸、三苯氧胺、吲哚美辛、异搏定、奥曲肽以后阿霉素对PANC-1的半数细胞生长抑制剂量。（6）用荧光光度法检测小剂量维甲酸、三苯氧胺、吲哚美辛、异搏定和奥曲肽对阿霉素在PANC-1细胞内积蓄的影响。（7）用流式细胞术检测单独使用阿霉素和联合使用小第二军医大学 硕士学位论文剂量维甲酸、三苯氧胺、吲哚美辛、异搏定、奥曲肽以后对PANC-1细胞生长周期分布情况：（6） 用末端标记法检测单独使用阿霉素和联合使用小剂量维甲酸、三苯氧胺、吲哚美辛、异搏定、奥曲肽以后PN乙1细胞凋亡的比例川： 结 果 门）甲氨蝶吟、5－尿嚼陡、丝裂霉素、长春地辛、羟基喜树碱、依托泊贰、顺铂、表阿霉素、毗柔比星和健择对40例原代胰腺癌细胞生长抑制率分别为 ZS．6士 17．90、41．3土20．70、45．4土23．00、38．4士246％、37．3土ZI．5％、39．5土20．7％、37．0土19刀％、33．7土21刀％。38．4士％和42．8％，共有33例旧3％）筛选至了抑末率＞6O％的药物； （2）40例胰腺癌标本 P53表达阳性 ZI例（52．5％），其中 P53（＋）12例，P53卜一 9例，与胰腺癌药敏结果分析：P53卜）组药物敏感性最高，P53 （广组敏感性最低；门）高浓度的维甲酸、奥曲肽对PANC刁有明显的抑制作用，高浓度的三苯氧胺对PANC习细胞有轻度的抑制作用，五种增敏药物低浓度时对PANC、细胞均无抑制作用：（4）卜霉素对PANC－l的IC50为 13．5 Illg／L，力用小剂量维甲酸。三苯氧胺、吼跺美辛、异搏定、奥曲肽后阿霉素对PANCl 的IC50依次为 5．lmz／L、7＊。s／L、8．8。s／L 5．2 ms／L和 8．5 mg／L 维甲酸、三苯氧胺、吼跺美辛、异搏定、奥曲肽对阿霉素耐药有明显的增敏作用，增敏倍数依次为2石9倍、1．79倍、1．53倍、2．59倍。和 1．5 8倍。乃）维甲酸，三苯氧胺，异搏定可以增加阿霉素在 PANC习细胞内积聚。u）维甲酸使 GO－GI 期细胞比例增加，S期细胞比例 3第二军医大学 硕士学位论文下降，PI降低，同时调亡比例增加。三苯氧胺使 GO们 期比例略有增加，细胞凋亡比例增加。蚓跺美辛使增值期细胞比例降低，调亡指数增加，奥曲肽使分裂期细胞明显减少，调亡细胞明显增加。 结 论 门）不同的胰腺癌细胞对不同的药物敏感，行体外药敏实验筛选敏感药物行个体化化疗应有一定的意义。Q）P53基因突变与胰腺癌化疗敏感性的关系是双向的。门）维甲酸、三苯氧胺、叼跺美辛、异搏定、奥曲肽对胰腺癌有化疗增敏作用。维甲酸增敏的机理与增加化疗药物的积聚、阻滞细胞周期、诱导凋亡有关，三苯氧胺增敏的机理与增加化疗药物积聚和诱导凋亡有关：呷跺美辛增敏机理主要与诱导凋亡有关；异搏定增敏机理与增加药物积聚有关：奥曲肽增敏机理主要与阻滞细胞周期、诱导凋亡有关。