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大豆胞囊线虫(Soybean cyst nematode, SCN; Heterodera glycines Ichinohe)是一种土传的定居性内寄生线虫,而且是危害世界大豆生产的主要病害之一。在同一地块上连年种植大豆会使土壤中越冬的胞囊大量积累,因此病害随着大豆连作年限的增加而逐年加重。但是近年来有报道大豆长期连作后出现大豆胞囊线虫自然衰退的现象,表现为连续种植大豆感病品种5年以上,大豆胞囊线虫的种群密度会明显降低,原来严重的病害症状会大大减轻或消失。在中国科学院海伦农业生态试验站长期连作定位区中也发现了该现象,并明确了该定位区的土壤为大豆胞囊线虫抑制性土壤。为了探讨大豆胞囊线虫抑制性土壤中的抑制因子及其发生机制,在该定位区中大豆胞囊线虫的胞囊、卵和二龄幼虫(J2)上分离寄生真菌,并对优势寄生真菌进行鉴定,制备发酵液,研究其对大豆胞囊线虫卵孵化的抑制和二龄幼虫活性的致死作用。抑制性土壤的研究对利用其自然衰退机制防治大豆胞囊线虫具有重要的学术价值和生产实践意义。2009年和2010年在中国科学院海伦农业生态试验站大豆连作19年和20年定位区中采集土样,通过大豆长期连作和轮作系统的胞囊线虫数量进行比较发现,大豆长期连作后,胞囊线虫的饱满胞囊即可育胞囊、卵及J2数量均明显少于大豆轮作系统,明确了该土壤为大豆胞囊线虫自然衰退土壤,即大豆胞囊线虫抑制性土壤。采用直接分离法,在大豆胞囊线虫抑制性土壤以及大豆胞囊线虫的胞囊、卵和J2上,共分离得到大豆胞囊线虫寄生真菌284株,其中在抑制性土壤中获得优势寄生真菌59株,胞囊优势寄生真菌49株,卵优势寄生真菌91株,J2优势寄生真菌4株。对其中的优势寄生真菌进行形态学鉴定,已鉴定出5个种和1个变种,分别为尖孢镰孢(Fusarium oxysporum)、尖孢镰孢芬芳变种(F. oxysporum var. redoles)、禾谷镰孢(F.graminearum)、锐顶镰孢(F. acuminatum)、厚垣轮枝菌(Verticillium chlamydosporia)和淡紫拟青霉(Paecilomyces lilacinus)。其中镰孢菌属菌株无论在抑制性土壤中还是胞囊上分离频率均最高,分别为67.12%和25%,为优势属;淡紫拟青霉在大豆胞囊线虫各个虫态上均分离得到。实验室条件下,对优势寄生真菌制备发酵液,研究其对大豆胞囊线虫卵孵化和J2活性的作用。镰孢菌属F-2和F-9两菌株发酵液对大豆胞囊线虫卵孵化的抑制率分别为95.7%和95.2%;木霉属T-2发酵液的抑制作用最强,在作用2周后孵化抑制率为97.2%,其次是T-1;而被测定的6株厚垣轮枝菌发酵液对卵孵化均无明显的抑制作用。对J2活性的作用测定,发现镰孢菌属F-9和木霉属T-发酵液在1h时抑制率分别为90%.和84.67%,在所有菌株中见效最快,即对J2的瞬间击倒率高。镰孢菌属F-2以及除了E-13以外的其他5株被测厚垣轮枝菌发酵液在72h时使全部J2致死。表明镰孢菌(Fusarium spp.) F-2和F-9,木霉菌(Trichoderma spp.)T-1和T-2,厚垣轮枝菌(Verticillium chlamydosporia) E-7和E-8是大豆胞囊线虫自然衰退土壤中的抑制性因子之一。