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生防菌短短芽孢杆菌(Brevibacillus brevis )JK-2是本实验室从土壤中分离得到一株芽孢杆菌菌株,经中科院及实验室的脂肪酸鉴定仪鉴定其为短短芽孢杆菌,研究发现其对枯萎病原菌,青枯菌均具有一定的拮杭作用,而且能够分泌抗菌物质到发酵液中。测定了短短芽孢杆菌(Brevibacillus brevis)JK-2的生长曲线;对其粗毒素性质进行考察,结果表明:在30℃,170 r/min的条件下,恒温振荡培养36 h,在以香蕉枯萎病菌病原菌作为指示菌的条件下,该菌株粗毒素具有一定的热稳定性;其粗毒素抑菌作用的最适pH值为7.0,在pH 3.0时和pH 11.0时,仍能维持较高的抑菌活性;此粗毒素对光照、蛋白酶K、紫外照射均不敏感。经硫酸铵沉淀后的粗毒素上清和沉淀均失去活性。采用80%的无水乙醇对粗毒素进行处理,实验结果表明:上清和沉淀溶解液均对香蕉枯萎病菌具有抑菌活性,但是在100℃水浴0.5 h后,沉淀失去活性。而上清的活性基本没有变。这说明粗毒素中至少存在两种活性物质。采用SDS-PAGE、HPLC等手段对处理液进行了研究。对JK-2胞外多糖采用Sephacryl S-200和Superdex-75柱进行分离,皆出现明显单峰;用红外光谱确定其组成成分。含有羧酸、吡喃单体,但无乙酰酯。研究了转荧光蛋白后的生防菌JK-2的侵染特性以及处理后对香蕉组培苗的相关抗病酶活性的影响,结果表明:在30℃,12 h黑暗12 h光照培养条件下,GFP-JK-2不能侵染香蕉组培苗。PPO,POD活性的明显高于对照,并且延迟了PPO活性到达最大值的时间。根部SOD活性变化不明显。茎部和叶片SOD的活性有低于对照的趋势。MDA的含量升高,并且MDA在香蕉组培苗植株体内含量大小为:叶片﹥根部﹥茎部。设置了不同处理对其诱导抗性进行了研究。在香蕉组培苗上接种香蕉枯萎病病菌和GFP-JK-2后,测定SOD、POD和PPO的活性及MDA含量变化。结果表明:接种GFP-JK-2菌株发酵液处理的PPO、POD活性明显高于其他处理,对其活性诱导分别在6 d、4 d以后但是病原菌首先对POD产生影响,所有处理对植株根茎的SOD活性与对照相比无明显变化,但是单独接种香蕉枯萎病菌的处理使叶片的SOD活性明显提高;接种病原菌和生防菌均使植株MDA含量有不同程度的升高,但是同时接种两种菌的处理使植株的MDA的变化较小。因此,经处理后对于植株的利弊有待于进一步研究。