胚胎附植是胎盘形成及其与子宫内膜接触并建立结构上的联系,从而实现母胎间交流的过程。其中,反刍动物胚胎附植为浅层附植,胎盘属于子叶型、脱膜胎盘,即胚胎不侵入子宫基质,仅与子宫内膜上皮细胞融合,实现母胎间的物质交换。胚胎附植是开启母胎间物质交换、胎盘发育和孕育优质胎儿的前提,为当前研究的热点。我们前期通过对大足黑山羊妊娠20d和30d胎盘转录组测序,筛选出分泌型磷酸蛋白基因（Secreted phosphoprotein 1,SPP1）,该基因被证实参与机体免疫调控、骨骼发育以及胚胎附植、胎盘发育等生理过程并发挥重要作用,我们研究也发现SPP1基因的多态性与山羊的胎盘效率及窝产羔数相关。但该基因在山羊妊娠早期胚胎附植和胎盘发育的作用尚不清晰。在人和小鼠研究中发现,DNA甲基化以及DNA甲基化相关酶在免疫反应、胚胎附植以及胎盘发育中起重要表观遗传作用,并且基因启动子区域甲基化程度会导致转录改变,从而影响基因的表达和功能。目前,DNA甲基化调控SPP1基因在山羊胚胎附植以及妊娠早期胎盘发育尚未见相关研究报道。本研究以大足黑山羊妊娠早期胎盘为研究对象,（1）通过苏木精-伊红染色（H＆E）对山羊妊娠早期胎盘结构进行检测,利用过碘酸-雪夫染色（PAS）对山羊妊娠早期胎盘滋养层细胞类型及分布进行了检测,从而探索妊娠早期山羊胎盘组织的结构特点以及母-胎间附植程度;（2）克隆大足黑山羊SPP1基因,利用生物信息学技术预测该基因序列和蛋白分子特性;（3）免疫组织化学、RT-qPCR和Western blot技术检测SPP1蛋白在山羊妊娠早期胎盘中的分布和表达模式,探索SPP1的生物学特征和表达规律;（4）利用RT-qPCR检测了SPP1主要受体整合素家族（ITGB1、ITGB3、ITGB5、ITGA2、ITGA3、ITGA5、ITGAV）、CD44以及Wnt5a的表达规律,构建山羊妊娠早期相关基因的动态表达模式;（5）利用MS-PCR检测了山羊不同妊娠时期胎盘SPP1基因启动子甲基化状态,并对SPP1及其受体基因与DNMTs、TETs的表达量进行相关性分析,挖掘SPP1及其受体与DNA甲基化相关基因间的关联;（6）利用DNA甲基化转移酶抑制剂5-Aza处理永生化滋养层细胞,进一步探究DNA甲基化对滋养层细胞中SPP1基因的影响,分析5-Aza诱导滋养层细胞中SPP1表达后对细胞功能的影响,从而探究DNA甲基化调控SPP1基因在山羊妊娠早期胎盘的机制。本研究结论如下:1、胚胎附植开始,滋养层巨细胞形成并持续存在于滋养层上皮,参与胎盘细胞融合、侵袭和迁移。2、成功克隆大足黑山羊SPP1基因序列,其在胎盘组织中的转录、翻译水平高,细胞核质均有表达。3、SPP1蛋白广泛分布于妊娠早期山羊胎儿胎盘滋养层及母体胎盘子宫阜,表达受DNA甲基化调控,可影响整合素家族相关受体基因表达。4、妊娠早期山羊胎盘中SPP1启动子区域发生了部分甲基化,5-Aza诱导抑制DNMT1及DNMT3b活性可调控SPP1启动子区域甲基化水平,从而影响滋养层细胞侵袭或胎盘发育。