芹菜素对人结肠癌HCT-8细胞生长抑制和诱导凋亡作用研究

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近年来,结肠癌的发病率呈逐年升高趋势,是我国常见恶性肿瘤之一,严重危害人类健康。临床对结肠癌的治疗仍以手术、化疗及其他辅助治疗为主。术后化疗毒副作用较多,对人体带来一定的损伤。芹菜素(apigenin,API)是一种黄酮类化合物,大量存在于水果、蔬菜、豆类、茶叶中。研究发现芹菜素具有抗癌、降压、降血脂、扩血管、抗炎等作用。关于芹菜素抗消化道肿瘤的研究,特别是对结肠癌的研究少见报道,其杀伤结肠癌等癌细胞的作用机制尚未明确。本研究主要以人结肠癌HCT-8细胞为研究对象,观察芹菜素对HCT-8细胞的生长抑制和诱导凋亡的作用,并对芹菜素杀伤人结肠癌HCT-8细胞的作用机制进行初步探讨。为初步观察芹菜素对结肠癌细胞有无生长抑制作用,本实验首先采用MTT法观察芹菜素对结肠癌细胞生长和增殖的影响,实验分阴性对照组、5μg·ml-1芹菜素组、10μg·ml-1芹菜素组、15μg·ml-1芹菜素组、20μg·ml-1芹菜素组,分别作用24h、48h、72h;采用了DNA凝胶电泳观察不同浓度(5μg·ml-1芹菜素组、10μg·ml-1芹菜素组、15μg·ml-1芹菜素组、20μg·ml-1芹菜素组和阴性对照组)对HCT-8的细胞的诱导凋亡情况;还采用流式细胞术检测不同浓度芹菜素(10μg·ml-1芹菜素组、20μg·ml-1芹菜素组)诱导HCT-8的细胞早期凋亡情况。同时对不同浓度芹菜素(5μg·ml-1、10μg·ml-1、15μg·ml-1、20μg·ml-1)做用于HCT-8的细胞后Caspase-3、Caspase-6酶活性进行了检测。实验发现,随着芹菜素浓度(5μg·ml-1、10μg·ml-1、15μg·ml-1、20μg·ml-1)的增加,细胞凋亡率逐渐增高且呈一定的量效关系;5μg·ml-1芹菜素组、10μg·ml-1芹菜素组、15μg·ml-1芹菜素组、20μg·ml-1芹菜素组作用于HCT-8细胞48小时检测到DNA Ladder,用药组梯状条带的亮度明显亮于对照组,且与药物剂量正相关;流式细胞术检测10μg·ml-1芹菜素组、20μg·ml-1芹菜素组,作用24小时细胞凋亡率分别为(19.16±0.14)%及(26.67±0.13)%;Caspase-3、Caspase-6酶活性显著增强。综上所述,本研究发现芹菜素对人结肠癌HCT-8细胞有抑制其生长、诱导其凋亡的作用。Caspase-3及Caspase-6酶活性有显著增加,芹菜素的诱导结肠癌细胞凋亡作用可能是通过此途径来完成的。但芹菜素抑制人结肠癌HCT-8细胞增殖是否还有其他途径有待进一步的研究。
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