基于气相色谱技术的尿糖探针和血清游离脂肪酸检测研究

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本论文分为两章:一、气相色谱法同时测定尿液中甘露醇等5种糖的研究采用气相色谱法建立同时测定尿液中甘露醇、乳果糖、蔗糖、果糖和葡萄糖的方法,本方法以肌醇为内标物,通过肟化反应和硅烷化反应后进样分析。在优化的检测条件下,各糖探针得到较好的分离。在测定范围内,甘露醇、乳果糖、蔗糖、果糖和葡萄糖的线性关系良好,相关系数均大于0.999;各种糖探针高、中、低三个浓度的日内精密度RSD小于2.69%,日间精密度RSD小于3.90%,回收率范围为85.13%-109.78%。此方法简便、灵敏、准确,可以满足临床尿样检测要求。二、串联毛细管色谱柱法用于血清游离脂肪酸的检测游离脂肪酸作为人体重要的活性物质,其组成的改变、含量的变化和代谢转换不仅揭示疾病的发生和发展,还可以有效评估药物疗效和研究药物作用机理。本章采用0.4 mol/L KOH-CH3OH和10%H2SO4-CH3OH分别对血清中的游离脂肪酸进行分离提取和衍生化,并研究不同极性组合的串联毛细管色谱柱的分离效果。结果显示第一维主分析柱SLB-IL-111和第二维从分析柱TR-5MS串联为最佳色谱柱组合方式。随后采用串联毛细管色谱法对混合游离脂肪酸进行分析。结果显示各游离脂肪酸的线性相关系数R2大于0.999,以高、中、低三个浓度进行考察,回收率在83.33%-110.09%之间,日内精密度RSD小于5.48%,日间精密度RSD小于6.31%,此方法能够满足临床快速、准确、高通量检测的需求,可以为研究游离脂肪酸代谢与疾病和药物疗效的关系提供方法学参考。
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