AT2受体在脑缺血再灌注中的作用及其机制的研究

被引量 : 1次 | 上传用户:cc023061227
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:脑缺血再灌注损伤(cerebral ischemia reperfusion injury,CIRI)是指缺血脑组织重新获得血供后,脑细胞功能代谢障碍及结构破坏进一步加重的现象,是由多种机制参与的可引起一系列细胞、分子及其调节过程变化的复杂的病理生理过程。血管紧张素Ⅱ (Angiotensin,Ang Ⅱ)是肾素血管紧张素醛固酮系统(renin angiotensin aldosterone system,RAAS)一种重要的多功能血管活性物质,可作用于特异的膜结合受体上,目前所知的RAAS的生物效应几乎均通过AngⅡ与相应的受体作用,其受体分为AngⅡ1型受体(AT1受体)和AngⅡ2型受体(AT2受体)两种。在许多情况下, AngⅡ与AT2受体结合和AngⅡ与AT1受体结合所介导的生物学效应及信号转导通路具有拮抗作用,如增殖/抗增殖,细胞分裂/分化和凋亡,血管收缩/舒张。在未成熟的大脑,AT2受体表达丰富且分布广泛,主要集中在与运动、感觉、学习相关的中枢区域及边缘系统的某些结构,但在成年大鼠中,这些部位的AT2受体显著减少。既往研究表明,在神经组织内AT2受体可以促进细胞的分化和再生,从而促进神经功能的恢复。本研究首先建立大鼠大脑中动脉闭塞(middle carotid artery occlusion,MCAO)模型,观察脑缺血再灌注损伤后脑组织中AT2受体的表达情况及相关因子的变化,探讨AT2受体在脑缺血再灌注损伤中的作用及其可能的机制,并进一步探讨坎地沙坦(Candesartan)对脑缺血再灌注损伤的影响和可能的机制,从而为脑缺血再灌注损伤提供新的治疗方向和理论依据。实验方法:1.建立MCAO模型。2. TTC染色检测脑梗死体积。3.免疫组化法检测脑组织AT2受体、IL1β、TNF α、IL10、c fos、c jun及大脑中动脉PCNA、α SM actin的表达。4. HE染色检测大脑中动脉横断面内膜、中膜面积并做内膜与中膜面积比。5. Real time PCR检测脑组织Bcl2mRNA、Bax mRNA的表达。6. Western blot检测脑组织Bcl2、Bax蛋白的表达。7.统计学处理:采用SPSS11.5软件进行统计学分析,所有数据以均值±标准差表示,采用t检验,P<0.05为差异有统计学意义。实验结果:1.免疫组化法检测AT2受体表达变化说明AT2受体参与了脑缺血再灌注过程:再灌注1天时脑组织中AT2受体表达量开始上升(P<0.05),于第7天达高峰,第10天表达量逐渐下降。2.免疫组化法检测IL1β、TNF α和IL10表达变化说明免疫炎症反应参与了脑缺血再灌注过程:与sham组比较,I/R组脑组织中IL-1β表达增加(P<0.05),TNF-α表达增加(P<0.05),IL-10表达增加(P<0.05)。3.免疫组化法检测大脑中动脉PCNA和α SM actin表达变化,HE染色检测大脑中动脉横断面内膜、中膜面积并做内膜与中膜面积比(I/M)说明脑缺血再灌注可引起缺血动脉内膜增生,进而导致血运重建后血管狭窄的发生:与sham组比较,I/R组缺血侧大脑中动脉PCNA表达增加(P<0.05),α-SM-actin表达减少(P<0.05); I/R组缺血侧大脑中动脉横截面的I/M值增大(P<0.05)。4.免疫组化法检测c fos、c jun表达变化,RT PCR检测Bcl2mRNA、BaxmRNA及Western blot检测Bcl2、Bax蛋白的表达变化说明细胞凋亡参与了脑缺血再灌注过程:与sham组比较,I/R组脑组织中Bcl-2mRNA的相对表达量减少(P<0.05),BaxmRNA的相对表达量增多(P<0.05);Bcl-2蛋白的相对表达量减少(P<0.05),Bax蛋白的相对表达量增多(P<0.05);c-fos表达增加(P<0.05),c-jun表达增加(P<0.05)。5.免疫组化法检测不同组AT2受体表达变化及TTC染色检测脑梗死体积说明AT2受体在脑缺血再灌注过程中起保护作用:给予CGP42112处理后脑组织中AT2受体表达量增加(*P<0.05vs.Control组),给予PD123319处理后脑组织中AT2受体表达量减少(#P<0.05vs.Control组);给予CGP42112处理后脑梗死体积缩小(*P<0.05vs.Control组);给予PD123319处理后脑梗死体积扩大(#P<0.05vs.Control组)。6.免疫组化法检测不同组IL1β、TNF α和IL10表达变化说明再灌注损伤后AT2受体通过抑制免疫炎症反应起神经保护作用:给予CGP42112处理后脑组织中IL-1β表达减少(*P<0.05vs.Control组),TNF-α表达减少(*P<0.05vs.Control组),IL-10表达增加(*P<0.05vs.Control组);给予PD123319处理后脑组织中IL-1β表达增加(#P<0.05vs.Control组),TNF-α表达增加(#P<0.05vs.Control组),IL-10表达减少(#P<0.05vs.Control组)。7.免疫组化法检测不同组大脑中动脉PCNA和α SM actin表达变化,HE染色检测大脑中动脉横断面的内膜、中膜面积并做内膜与中膜面积比(I/M)说明再灌注损伤后AT2受体通过抑制血运重建后血管狭窄的发生起神经保护作用:给予CGP42112处理后,缺血侧大脑中动脉PCNA表达减少(*P<0.05vs.Control组),α-SM-actin表达增加(*P<0.05vs.Control组),给予PD123319处理后缺血侧大脑中动脉PCNA表达增加(#P<0.05vs.Control组),α-SM-actin表达减少(#P<0.05vs.Control组);给予CGP42112处理后动脉横截面的I/M值减小(*P<0.05vs.Control组);给予PD123319处理后动脉横截面的I/M值增大(#P<0.05vs.Control组)。8.免疫组化法检测不同组c fos、c jun表达变化,RT PCR检测Bcl2mRNA、BaxmRNA及Western blot检测Bcl2、Bax蛋白的表达变化说明再灌注损伤后AT2受体通过抑制神经细胞的凋亡起神经保护作用:给予CGP42112处理后脑组织中Bcl-2mRNA的相对表达量增加(*P<0.05vs.Control组),BaxmRNA的相对表达量减少(*P<0.05vs.Control组),给予PD123319处理后脑组织中Bcl-2mRNA的相对表达量减少(#P<0.05vs.Control组),BaxmRNA的相对表达量增加(#P<0.05vs.Control组);给予CGP42112处理后脑组织中Bcl-2蛋白的相对表达量增加(#P<0.05vs.Control组),Bax蛋白的相对表达量减少(#P<0.05vs.Control组);给予PD123319处理后脑组织中Bcl-2蛋白的相对表达量减少(*P<0.05vs.Control组),Bax蛋白的相对表达量增加(*P<0.05vs.Control组)。9.免疫组化法检测不同组AT2受体表达变化及TTC染色检测脑梗死体积说明再灌注损伤后Candesartan可通过促进AT2受体的表达起神经保护作用:给予Candesartan处理后脑组织中AT2受体表达量增加(P<0.05);脑梗死体积缩小(P<0.05)。结论:1.脑缺血再灌注后,脑组织AT2受体表达增加。2.脑缺血再灌注损伤可诱发脑组织内免疫炎症反应、血液重建后缺血动脉狭窄及神经细胞凋亡。3. AT2受体在脑缺血再灌注过程中起保护作用,这种保护作用可能通过抑制免疫炎症反应、血运重建后血管狭窄的发生及神经细胞的凋亡而实现。4. Candesartan在脑缺血再灌注过程中起保护作用,这种保护作用可能是通过促进AT2受体在再灌注脑组织中的表达,进而促进AT2受体所介导的神经保护作用而实现。
其他文献
近年来,随着Android. IOS以及Windows Phone等手机智能操作系统的普及,传统手机逐渐被智能手机所取代。手机交互界面是智能手机操作的主要平台,而其中的图标设计是手机交互界
互联网技术和无线通信技术的飞速发展的同时,带动了移动通信业务从早期的简单的语音业务向数据业务的过渡。尽管早期的电子商务已经能够给人们带来很大的便利和乐趣,大大提高了
目的探讨Y染色体微缺失与男性特发性不育及非特发性不育间的关系。方法利用染色体核型分析、PCR技术、血清内分泌激素及精浆果糖定量检查,对324例男性不育患者(特发性不育206例
目的探讨解脲支原体(UU)、沙眼衣原体(CT)感染情况与生殖道微环境改变及不孕的临床关系。方法收集2018年7月至2019年5月于中山大学附属第七医院生殖医学中心门诊诊治的输卵管
结合《内经》关于六经气血盛衰的论述,分析六经之常在水液代谢中的作用。六经各自的气血盛衰的生理特点不同,经络循行不同,各自脏腑的作用不同,决定了各自在水液代谢中的不同
新时代背景下,农村集体经济呈现出新内涵,经营过程中涉及到的资源和参与主体已经越出农村边界,且对农村经济发展和乡村振兴具有很强的推动作用。上饶市在推动13个省级试点村
<正>引言前些日子接到重庆师范大学唐力生教授的电话,就苏石林在当时苏联声乐界和教育界的地位以及对中国声乐艺术发展的影响(正面或者负面)展开了长时间的询问与探讨,试图对
为研究荒漠草原不同生境中琵甲昆虫群落结构及其多样性变化,分析其与土壤及植被等环境因子的关系,2010年3-10月利用巴氏罐诱法采集盐池四墩子6个不同植被类型的荒漠草原样带
讨论了镧热还原氧化钐过程的动力学环节,分析了还原过程镧-钐合金存在的可能性,采用反证法确定了制备金属钐温度下的动力学控速环节.依据确定的控速环节,很好地解释了相关文