猪链球菌2型(Streptococcus suis serotype2,SS2)是一种人兽共患的传染病病原,不仅可引起猪脑膜炎、关节炎、心内膜炎、败血症、肺炎和突然死亡,还可感染相关人员并致死,在我国和其他养猪业发达的国家已多次流行,对养猪业造成了巨大的经济损失。它能产生多种毒力因子,如荚膜多糖、溶血素、溶菌酶释放蛋白、胞外蛋白因子等,主要通过消化道、呼吸道、受损伤的皮肤及粘膜感染。该菌一般对猪、兔、小鼠、豚鼠敏感,也可感染人、牛、羊、马、犬、猫等动物。在科研中,动物致病性试验在细菌病原学研究方面起着重要作用,它不仅可作为判断菌株毒力的标准,也可用于研究致病机理,对该病的防控具有重要意义。本试验选择不同来源的具有不同毒力因子表现型的猪链球菌2型2个菌株SS2-1和SS2-GN人工感染家兔,对其进行致病性试验。分不同剂量、不同感染途径、不同时间段采样等试验组,通过临床症状观察、病理变化、分离病原菌、荧光PCR检测,以期探索出SS2感染家兔的致病性规律以及研究细菌在家兔不同组织的定位定量和动态分布。首先,建立了荧光定量PCR检测方法。根据猪链球菌2型cps2J和mrp基因分别设计一对引物和相应的Taqman探针,提取菌株基因组DNA作为模板,成功建立起荧光定量PCR反应体系,其特异性和敏感性、定量线性关系良好。进行了菌落计数与定量PCR的相关性试验和健康动物组织中的人工布菌试验。其次,进行了猪链球菌2型感染家兔模型的研究。分别以静脉、肌肉、皮下、滴鼻、口服五种途径感染109CFU的SS2-1,结果前四者均引起发病或死亡,口服不发病,以静脉感染发病最为急性；分别静脉注射109、108、107、106、105CFU的SS2-l；分别肌肉注射108、106CFU的SS2-1,结果均发病并有死亡,结果提示感染剂量与发病程度有正相关性；肌肉注射108CFU的SS2-1,在不同时间点取动物组织检测菌体含量,结果提示体内含菌量随时间推移递增,发病高峰时达最高值。分别以静脉、肌肉、皮下三种途径感染109CFU的SS2-GN,结果只有静脉引起发病且死亡,后两者仅引起发病,并无死亡；静脉注射108CFU的SS2-GN,动物均发病并有死亡,在不同时间点取样检测含菌量,结果与SS2-1相似。家兔感染SS2后有高热(41℃以上)、精神食欲不振、侧卧及不能站立,个别有神经症状。剖检后组织有明显病变。从感染发病动物组织中能分离出该菌。病死兔组织含菌量较高,其中以脾最高,肝、肾、肺次之,脑、淋巴结较低。试验证明SS2-1和SS2-GN对家兔易感,致病性稳定,细菌在动物体内增殖稳定且具有规律性,有可能作为猪链球菌2型感染的动物模型去研究。