山豆根种子内生真菌及其抑菌活性成分研究

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豆科植物越南槐Sophora tonkinensis Gagnep.的干燥根及其根茎被称为山豆根,山豆根富含黄酮、生物碱及多糖类物质,且具有抗肿瘤、抗炎、抑菌、保肝等药理作用,其主要活性物质成分为苦参碱和氧化苦参碱。从药用植物内生菌的次级代谢产物中寻找具有生物活性且结构新颖的化合物是药用植物研究热点之一。目前尚未有关于山豆根内生真菌的资料报道。基于此,本研究对山豆根种子的内生真菌进行了初步研究,主要结果如下:(1)从山豆根种子中共分离得到28株内生真菌,分别属于半知菌门Deuteromycetes和子囊菌门Ascomycota中的14个种。其中,Colletotrichum aff. boninense LA79, Colletotrichum graminicola, Colletotrichum hymenocallidis, Diaporthe pseudomangiferae所占百分比分别为17.86%、14.29%、10.71%、10.71%,均为优势种。(2)得到对田七根腐病病原菌、田七炭疽病病原菌、田七黑斑病病原菌抑制率达40%以上的内生真菌分别有3、5、2种菌株。其中Penicillium citrinum菌株对三者抑制率均达到50%以上。(3)选取Penicillium citrinum作为发酵生产菌株,提取其发酵产物,得到粗提物。经抑菌活性实验证明,粗提物浓度为2.5mg/mL时,抑制炭疽病病原真菌和黑斑病病原真菌的生长。(4)经过发酵得到具有抑菌活性的粗提物浸膏137g,从中分离并鉴定出6个单体化合物,分别是大黄素、coniochaetones B、penicitrinol A,麦角甾-5,7,22-三烯-3p-醇、肉豆蔻酸和软脂酸。
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