雷公藤内酯醇对高糖环境下人视网膜血管内皮细胞增殖及VEGF表达的影响

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目的:研究不同浓度的雷公藤内酯醇对体外高糖环境下培养的人视网膜血管内皮细胞(HRCECs)增殖及血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法:1、将捐献的人眼球提取出来的HRCECs进行体外培养,取发育良好的第3~4代细胞用于实验。2、运用噻唑蓝比色法(MTT)来检测不同浓度的雷公藤内酯醇作用下高糖环境下体外培养的HRCECs增殖的情况。3、运用Western blot方法来检测各个分组HRCECs的VEGF含量。结果:MTT比色法结果显示:通过不同浓度的雷公藤内酯醇的对高糖环境下培养的HRCECs的干预,HRCECs的增殖不同程度的受到抑制。具体表现如下:1、在相同培养时间下,低糖组HRCECs数目明显少于高糖组,P<0.05,具统计学有意义;2、在相同培养时间(分别为24h,36h,48h)下,高糖组和高糖组+不同浓度雷公藤内酯醇(20nmol/l、40nmol/l、60nmol/l)组进行对比,在一定浓度范围内,HRCECs的抑制率随着雷公内酯醇浓度的增加而呈现增高趋势。3、在同一雷公藤内酯醇浓度干预下,不同时间点之间进行两两对比,在一定时间范围内,HRCECs的抑制率随着干预时间的延长而呈现增高趋势。4、在相同培养时间(分别为24h,36h,48h)下,高糖组和高糖+溶剂对照组之间吸光度值在统计学上无显著差异,P>0.05,无统计学意义。Western blot显示:1、在相同培养时间下,对比蛋白条带的灰度值低糖组HRCECs的VEGF的表达量均明显低于高糖组,P<0.05,具有统计学意义;2、在同一培养时间下,高糖组和高糖+不同浓度雷公藤内酯醇(20nmol/l、40nmol/l、60nmol/l)组,不同的组别之间进行两两比较,随着雷公藤内酯醇的浓度的增加,对比蛋白条带的灰度值HRCECs的VEGF的表达量呈下降趋势,P<0.05,具有统计学意义;3、在同一雷公藤内酯醇浓度干预下,不同时间点之间进行两两对比,在一定时间范围内,随着干预时间的延长,对比蛋白条带的灰度值HRCECs的VEGF的表达量呈下降趋势,P<0.05,具有统计学意义。4、在相同培养时间(24h,36h,48h)下,高糖组和溶剂对照组,通过对比蛋白条带灰度值,两组间的HRCECs的VEGF的表达量无显著差异,P>0.05,不具有统计学意义;结论:1、雷公藤内酯醇对体外高糖环境下培养的HRCECs的增殖起抑制作用,具一定的浓度、时间依赖性;2、雷公藤内酯醇能够降低高糖环境下培养的HRCECs的VEGF的表达,并且也具有一定的浓度、时间依赖性。
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